Платформа для: iSpring Market, GetCourse, Learme, Антитренинги, Udemy и др.

Содержание

7 платформ для создания и размещения онлайн-курсов

Собрать все ваши материалы в единый онлайн-курс, разместить его в Интернете, привлечь аудиторию – мы выбрали 5 лучших платформ, с помощью которых легко можно все это сделать.

Если вы хотите поделиться своими знаниями с широкой аудиторией и монетизировать их, то лучший способ это сделать – онлайн-курс. Онлайн-образование становится все более популярным, а создание онлайн-курсов все более простым и доступным каждому.

Мы выбрали 5 самых популярных платформ, где вы можете создавать и продвигать ваши онлайн-курсы.

Udemy

Изображение: teach.udemy.com

Вероятно, самая популярная опция среди всех имеющихся вариантов. Помимо того, что на сайте уже есть большая аудитория, которая может стать слушателями вашего курса, платформа абсолютно бесплатна, если вы будете продвигать ваш курс сами. В случае если вы хотите, чтобы Udemy продвигала ваш курс, необходимо будет отдавать платформе 50% полученной прибыли.

Само создание курса на платформе осуществляется достаточно просто, но если у вас вдруг возникли сложности, то платформа обещает поддержку 24/7.

На Udemy даже есть свой онлайн-курс о том, как создать онлайн-курс на этой платформе.

Сайт: Udemy Teach

iSpring Online

Это российская платформа для организации полного цикла дистанционного обучения. В ней есть несколько инструментов для создания онлайн-курсов, сервиса для размещения курсов и создания учебного портала. Обучение геймифицировано: пользователи получают очки, бейджи и попадают в рейтинг.

Сервис значительно упростит процесс обучения в организации. Сервис поддерживает все виды учебного материала – онлайн-курсы, видеолекции, тесты и презентации. iSpring Online не нужно устанавливать на сервер и настраивать.

Интерфейс и поддержка платформы на русском языке. Можно получить демо-доступ для тестирования. Истории клиентов можно прочитать по ссылке. Подробнее о том, как работать с сервисом, читайте в материале Теплицы.

Сайт iSpring Online. (На правах реламы).

Pluralsight

Изображение: pluralsight.com/teach

Для того чтобы опубликовать онлайн-курс на этой платформе, нужно, чтобы вашу заявку рассмотрели и утвердили (для этого нужно прислать короткое видео, рассказывающее о проекте). Но зато, если это произошло, вы получите доступ к миллионной аудитории, среди которой много корпоративных клиентов.

Сайт: Pluralsight

Skillshare

Изображение: skillshare.com/teach

Еще одна популярная платформа, на которой можно разместить ваш онлайн-курс, и для этого вам совсем не обязательно обладать каким-либо преподавательским опытом или специальными навыками, на платформе вы сможете получить необходимую помощь.

Платформа Skillshare сосредоточена, главным образом, на творческих курсах самой разной тематики – от дизайна и кулинарии до IT и фотографии. Средний доход от онлайн-курса составляет $3 500 в год.

Сайт: Skillshare

Teachable

Изображение: teachable.com

Teachable (в недавнем прошлом – Fedora) – это платформа для создания и публикации ваших онлайн-курсов. От предыдущих платформ Teachable отличается тем, что это не образовательный ресурс и, соответственно, не имеет своей аудитории – ее вам придется привлекать самим.

Зато у Teachable мощный редактор курса, который поможет вам собрать вместе все ваши материалы и сделать все именно так, как вы хотите, а также бесплатный план, с которого вы можете начать, чтобы понять, насколько вам подходит и нравится эта платформа.

Сайт: Teachable

Ruzuku

Изображение: ruzuku.com

Еще один конструктор онлайн-курса, полный разнообразных функций, включающих возможности настройки визуального оформления курса и интеграцию с платежными системами и клиентами для рассылок.

Некоторым недостатком платформы является относительно высокий тарифный план – он начинается с $79 в месяц. На сайте доступна бесплатная 14-дневная версия.

Сайт: Ruzuku

iSpring Market

Изображение: iSpring Market.

Запущена уникальная онлайн-платформа для предприятий, готовых к исследованиям

Вице-губернатор Челябинской области Руслан Гаттаров представил на Форуме «Малый и средний производственный бизнес — будущее экономики страны» уникальную онлайн-платформу для исследователей из Бизнеса любых отраслей и направлений. Она работает по принципу «Open Science» — на одном сайте собраны все лаборатории и центры компетенций региона, а так же центры НТИ страны. Воспользоваться онлайн сервисом можно на любой стадии разработки проекта – от идеи нового продукта, проведения НИОКР и до серийного запуска. Проект запущен при поддержке регионального правительства и Центра кластерного развития Челябинской области, сообщает пресс-служба минэкономразвития региона.


Создание единой цифровой платформы кооперации университетов и организаций реального сектора экономики – одно из мероприятий национального проекта «Наука».

Запустить такую платформу в России планировалось к 2021 году. Челябинская область стала  это делать уже сейчас, создавая условия для  опережающие развития экономики региона и понимая высокий уровень конкуренции как внутри страны так и на международной арене.

Теперь, чтобы провести расчеты на суперкомпьютере, спрогнозировать воздействие температуры и давления на деформацию сплавов, применить технологии машинного обучения и компьютерного зрения в производстве или изготовить опытный образец из различных материалов, достаточно выбрать лабораторию и отправить запрос в один клик. Это избавляет региональные компании от необходимости покупать дорогостоящее оборудование и иметь в штате постоянных технических специалистов, конструкторов и ученых нужного профиля.

На сегодняшний день в проекте участвуют 9 вузов, которые готовы предоставить оборудование своих лабораторий во временное пользование либо совместно провести разработки. На платформе размещена информация о 85 единицах технологического оборудования, установленных в 30 научных лабораториях по всей Челябинской области и центрах компетенции НТИ. Их функционал охватывает различные сферы разработок и исследований в области промышленности, информационных технологий, сельского хозяйства, робототехники, нано технологий, аэрокосмической промышленности, маркетинга и рекламы, а так же промышленного дизайна. Например, можно отправить запрос на исследование загруженности трансмиссии транспортного средства, заказать услугу по постановке и визуализации реалистичных изображений с использованием программного обеспечения компьютерной графики, провести с помощью суперкомпьютера инженерное моделирование и анализ, создать цифрового двойника и решить иные исследовательские задачи.

На сайте можно увидеть не только функционал оборудования. Там размещены технические характеристики объекта, примеры реализованных проектов с использованием того или иного оборудования, а также контакты представителя организации и в один клик направить запрос.

«Создание таких платформ — это необходимое условие для увеличения объемов НИОКР и развития высокотехнологичных производств в регионе. Она собрала в себе лучшие лаборатории и цифровое  оборудование, уникальные и передовые центры компетенций, – а это одно из приоритетных направлений научно-технического развития региона, которое реализуется в рамках Стратегии2035, инициированной Губернатором Борисом Дубровским»

, — комментирует вице-губернатор Челябинской области Руслан Гаттаров.

«Платформа технологических сервисов призвана облегчить и ускорить взаимодействие вузов и бизнеса. Мы сами прошли все лаборатории и центры компетенций, пообщались со всеми специалистами, потестировали в работе оборудование и отобрали только передовые центры и те, которые готовы работать в рыночной бизнес логике, становясь реальной поддержкой бизнесу», — отметила Директор Центра кластерного развития Яна Коваленко.

Презентация новой платформы состоялась в рамках Третьего межрегионального Форума «Малый и средний производственный бизнес — будущее экономики страны», организованного ЧОО «Опора России».

Форум объединил представителей производственного бизнеса и инфраструктур поддержки предпринимательства из разных регионов страны.

IT-платформа для перевозчиков – Atlas Chain

г МоскваСтавропольский край, г Минеральные Водытент 20т.13.02.202146 000
Краснодарский край, г НовороссийскМосковская обл, г Коломнареф 20т.13.02.202149 501
Краснодарский край, г НовороссийскРесп Башкортостан, г Стерлитамак
реф 20т.
13.02.2021121 404
Краснодарский край, г Новороссийскг Ижевскреф 20т. 13.02.2021111 172
Краснодарский край, г Новороссийскг Пензареф 20т.13.02.202164 254
Краснодарский край, Динской р-н, ст-ца Пластуновскаяг Киров
реф 10т.
13.02.202161 180
г СмоленскМосковская обл, г Коломнареф 20т.13.02.202125 936
г СмоленскРесп Башкортостан, г Стерлитамакреф 20т.96 674
г Санкт-ПетербургРостовская обл, г Батайскреф 20т.13.02.202171 203
г Санкт-ПетербургРостовская обл, г Батайскреф 20т.13.02.202173 672
г Санкт-ПетербургРостовская обл, г Батайскреф 20т.13.02.202171 203
г Санкт-ПетербургКраснодарский край, Кавказский р-н, г Кропоткинреф 20т.77 441
г Санкт-ПетербургКраснодарский край, Кавказский р-н, г Кропоткинреф 20т.13.02.202177 441
г Санкт-Петербургг Новосибирскреф 20т.13.02.2021192 002
г Санкт-Петербургг Новосибирскреф 20т.13.02.2021192 002
г Санкт-Петербургг Оренбургреф 20т.13.02.2021106 196
Краснодарский край, г НовороссийскМосковская обл, г Дмитровреф 20т. 14.02.202155 282
Краснодарский край, г НовороссийскМосковская обл, г Коломнареф 20т.14.02.202149 501
Краснодарский край, г НовороссийскРесп Башкортостан, г Стерлитамакреф 20т.14.02.2021121 404
г Краснодар, поселок Дорожныйг Краснодарреф 1т.14.02.20214 002

Профессионалы 4.0 – платформа для реализации бизнес‑проектов в гибких командах

ОЭЗ «Дубна» заключила соглашение о сотрудничестве с компанией «Газпром нефть»

Читать подробнее

О запуске второго канала П4. 0 «Фриланс будущего» в Telegram

Читать подробнее

Почему гиг-экономика — это эволюция аутсорсинга, а платформенная занятость — тренд?

Читать подробнее

П4.0 & Сколково провели совместное исследование феномена гибких команд

Читать подробнее

Чем интересны Профессионалы 4.0 для талантов

Читать подробнее

Как подготовиться к собеседованию в проект П4.0

Читать подробнее

Подкаст П4.0 «Коронавирус и карьера. Как изменился рынок труда»

Читать подробнее

Как таланты обновили лендинг П4.0 для бизнеса

Читать подробнее

Профессионалы 4.0 в новом выпуске на канале «АйТиБорода»

Читать подробнее

Секреты продуктивной работы на удалёнке

Читать подробнее

Специфика работы суперсилы — трекера в реализации проекта

Читать подробнее

Полезные лайфхаки по работе на П4.0

Читать подробнее

Форматы работы на Профессионалах 4.0

Читать подробнее

Все, что нужно знать о загрузке в проектах

Читать подробнее

Личные истории: Мария Романова о работе в проекте по международному маркетингу

Читать подробнее

Жизненный цикл «отклика на проект»: что важно знать о каждом этапе

Читать подробнее

Как платформа П4. 0 драйвит гиг-экономику в России

Читать подробнее

Включаем пуш-уведомления в мобильном приложении платформы П4.0

Читать подробнее

За 30 минут коротко о главном: новый образовательный курс «Введение в процесс закупок»

Читать подробнее

Как сделать проекты платформы «Профессионалы 4.0» основной работой

Читать подробнее

Новая статья «Между наймом и фрилансом: удалёнка сближает» уже доступна на Хабре

Читать подробнее

3 правила нетворкинга на платформе

Читать подробнее

Личный опыт: Как совмещать офис и работу над проектами?

Читать подробнее

Бриф-менеджер Денис Злоказов о платформе Профессионалы 4.0

Читать подробнее

Чем гибкая команда отличается от рабочей группы?

Читать подробнее

В статье «Как понять, талант ли я?» мы подробно рассказываем, кого называем талантами и какие компетенции нужны для работы на проектах П4.0

Читать подробнее

Рассказали о платформе Профессионалы 4.0 в выпуске подкаста Ксении Ильянович, бизнес-тренера по тайм-менеджменту

Читать подробнее

Это тема первой статьи на нашем канале в Яндекс Дзен. В ней мы рассказываем: кто такой талант

Читать подробнее

Почему таланты выбирают фриланс?

Читать подробнее

Как попасть в отбор команды на проект

Читать подробнее

Разработка концепции АЗС с нулевым внешним потреблением электроэнергии

Читать подробнее

Анализ мирового рынка скважинного оборудования для добычи сланцевой нефти

Читать подробнее

5 простых шагов, чтобы получить шанс поучаствовать в проектах крупного бизнеса в 2020 году

Читать подробнее

8 веских причин присоединиться к сервису Профессионалы 4.0

Читать подробнее

На Профессионалах 4.0 размещён 300-й юбилейный проект — UX/UI-анализ цифровой платформы технологического центра «Бажен»

Читать подробнее

К команде Профессионалов 4.0 присоединилось 9000 специалистов!!!

Читать подробнее

Трекеры команд «Профессионалов 4.0»: Ирина Касаева

Читать подробнее

Профессионалы 4.0 стали лауреатом премии «Цифровая пирамида – 2020» в номинации HR TECH-продукт года

Читать подробнее

Разработан конфигуратор офисных пространств «Газпром нефти»: собрали команду-настроили работу

Читать подробнее

Вебинар про гибкие команды

Читать подробнее

Высокий рейтинг увеличивает шансы получить следующие проекты или задачу

Читать подробнее

Новые проекты «Газпром нефти» для специалистов на удаленку

Читать подробнее

Инструкция. Как заполнить профиль, чтобы увеличить шансы получить проект на Профессионалах 4.0

Читать подробнее

Трекеры команд «Профессионалов 4.0» : Дмитрий Орлов

Читать подробнее

Чем Профессионалы 4.0 отличаются от фриланса? Вы спрашивали — мы отвечаем!

Читать подробнее

Сократили время бренд-аудита АЗС в 5 раз! Ирина Суворова о реализации проекта на платформе «Профессионалы 4.0»

Читать подробнее

5 новых проектов на Профессионалах 4.0

Читать подробнее

Мы помогаем командам реализовать проект, бесплатно предоставляя услугу по сопровождению проектов — трекинг

Читать подробнее

Команда проекта по оптимизации логистики МФЦ успешно защитила свою работу на встрече с Администрацией Ленинградской области

Читать подробнее

Гибкая команда – что это? Кто эти люди? Все просто: это специалисты, работающие над совместным проектом удалённо

Читать подробнее

Каждый профессионал — немного супергерой

Читать подробнее

Профессионалы 4.0 уже год соединяет талантливых специалистов со всей страны и реальные задачи крупного бизнеса

Читать подробнее

Дистанционка – новая реальность для бизнеса

Читать подробнее

Антон Шершнев и Виктор Дейнеко о том, как с помощью «Профессионалов 4. 0» нашли исполнителя на проект по редизайну портала СУОД

Читать подробнее

Корпоративный университет «Газпром нефти» разместил проект по исследованию возможностей нейронных сетей в обучении, и нашел команду

Читать подробнее

Как в 2020 году попасть на работу к нефтяникам, или Почему миллениалы хотят быть фрилансерами

Читать подробнее

Проект по нематериальной мотивации сотрудников: Айрат Садыков про итоги проекта и внедренные результаты

Читать подробнее

Success story по итогам проекта Дирекции цифровой трансформации

Читать подробнее

Никита Пономаренко, исполнитель проекта по UX/UI-анализу системы поддержки принятия решений для Технологического центра «Бажен» о выборе проекта

Читать подробнее

КРОК не только стала партнером «Профессионалов 4.0», но и собрала опыт экспертов рынка на Кейсориуме по технологиям индустрии 4.0

Читать подробнее

Speed Dating с Платформой «Профессионалы 4.0»

Читать подробнее

Вести с полей: 4 заказчика «Газпром нефти» выбрали исполнителей из аудитории «Цифрового прорыва» для реализации проектов!

Читать подробнее

Хэппи сторис о проекте по монетизации цифровой платформы «Бажен», реализованной на «Профессионалах 4.

Читать подробнее

«Газпром нефть» и АНО «Россия — страна возможностей» будут развивать кадровый потенциал страны

Читать подробнее

«Газпром нефть» поддержит финалистов конкурса «Цифровой прорыв»

Читать подробнее

Дмитрий Ялов, Заместитель Председателя Правительства Ленинградской области, поделился опытом успешно реализованных проектов на платформе

Читать подробнее

Онлайн-платформа «Профессионалы 4.0» привлекла более 4 тысяч участников

Читать подробнее

Участники проекта «Профессионалы 4.0» выступили со своими предложениями по модернизации инвестиционного портала Ленобласти

Читать подробнее

Платформа «Профессионалы 4.0» на образовательном интенсиве «Остров 10-22»

Читать подробнее

«Газпром нефть» заключила соглашения о развитии платформы «Профессионалы 4.0» c СИБУР, бизнес-школой СКОЛКОВО и администрацией Ленинградской области

Читать подробнее

Состоялся первый квест Case Challenge  по решению бизнес задач на платформе «Профессионалы 4.0»

Читать подробнее

«Газпром нефть» придумала занятие для участников конкурса «Лидеры России»

Читать подробнее

Microsoft 365 для бизнеса | Майкрософт

Возможности продукта

 

Microsoft 365 бизнес базовый Microsoft 365 бизнес стандарт Microsoft 365 бизнес премиум
 

Microsoft 365 бизнес базовый

312,50 ₽ на пользователя в месяц

(подписка на год)

Microsoft 365 бизнес базовый, 312,50 ₽ на пользователя в месяц (подписка на год)

Цена не включает налоги.

Microsoft 365 бизнес стандарт

781,30 ₽ на пользователя в месяц

(подписка на год)

Microsoft 365 бизнес стандарт, 781,30 ₽ на пользователя в месяц (подписка на год)

Цена не включает налоги.

Microsoft 365 бизнес премиум

1 250,00 ₽ на пользователя в месяц

(подписка на год)

Microsoft 365 бизнес премиум, 1 250,00 ₽ на пользователя в месяц (подписка на год)

Цена не включает налоги.

 
Частично включено Включено

Мобильные и веб-версии приложений Office

Мобильные и веб-версии приложений Office

Кнопка в заголовке для развертывания 3 строк таблицы ниже

Included

Included

Included

Пользуйтесь веб-версиями Outlook, Word, Excel, PowerPoint и OneNote

Included

Included

Included

Используйте всегда актуальные версии Outlook, Word, Excel, PowerPoint и OneNote для устройств с iOS и Android®4 для пяти телефонов и пяти планшетов1

Included

Included

Included

Организуйте совместную работу с функциями редактирования в реальном времени (несколько пользователей могут вместе работать над одним документом)

Included

Included

Included

Электронная почта и календари

Электронная почта и календари

Кнопка в заголовке для развертывания 6 строк таблицы ниже

Included

Included

Included

Получите почтовые ящики размером 50 ГБ

Included

Included

Included

Используйте собственное доменное имя (например, ваше_имя@ваша_компания. com)

Included

Included

Included

Пользуйтесь корпоративной почтой на телефонах, планшетах, компьютерах и в браузере с приложением Exchange

Included

Included

Included

Управляйте своим календарем, планируйте собрания на основе сведений об удобном для сотрудников времени, настраивайте напоминания

Included

Included

Included

Легко назначайте собрания и отвечайте на приглашения с помощью общих календарей

Included

Included

Included

Настраивайте новые адреса электронной почты, восстанавливайте недавно удаленные учетные записи, создавайте пользовательские сценарии и делайте многое другое, где бы вы ни находились

Included

Included

Included

Хранение и совместное использование файлов

Хранение и совместное использование файлов

Кнопка в заголовке для развертывания 5 строк таблицы ниже

Included

Included

Included

Храните файлы в облачном хранилище OneDrive размером 1 ТБ и предоставляйте к ним общий доступ

Included

Included

Included

Работайте с файлами и сохраняйте их в OneDrive или SharePoint — ваши изменения будут отражаться на всех синхронизируемых устройствах

Included

Included

Included

Делитесь файлами с внешними пользователями с помощью ссылок для доступа и гостевых ссылок

Included

Included

Included

Пользуйтесь безопасными средствами для предоставления общего доступа к документам и отправки сообщений — ваша информация будет доступна только пользователю с соответствующими правами

Included

Included

Included

Работайте с файлами и синхронизируйте их на компьютерах с Windows или macOS и мобильных устройствах

Included

Included

Included

Командная работа и взаимодействие

Командная работа и взаимодействие

Кнопка в заголовке для развертывания 5 строк таблицы ниже

Included

Included

Included

Проводите онлайн-собрания и осуществляйте видеозвонки с участием до 300 пользователей в Microsoft Teams2

Included

Included

Included

Беседуйте со своими коллегами в чате Microsoft Teams, даже если вы не за компьютером, а в пути

Included

Included

Included

Общайтесь и сотрудничайте легко и непринужденно — Microsoft Teams обеспечит вам и вашей команде единую централизованную платформу для бесед в чате, проведения собраний, работы с файлами и приложениями

Included

Included

Included

Используйте SharePoint, чтобы создать сайты групп и наладить обмен информацией, контентом и файлами в интрасети

Included

Included

Included

Присоединяйтесь к собраниям в пути по номеру телефонного подключения с помощью Аудиоконференций6

Безопасность и соответствие требованиям

Безопасность и соответствие требованиям

Кнопка в заголовке для развертывания 4 строк таблицы ниже

Included

Included

Included

Защитите свою электронную почту от спама, вредоносных программ и известных угроз с помощью Exchange Online Protection

Included

Included

Included

Более тысячи инструментов для управления безопасностью и конфиденциальностью помогут вам обеспечить соответствие требованиям международных, региональных и отраслевых нормативов и стандартов

Included

Included

Included

Группы безопасности и настраиваемые разрешения позволяют контролировать доступ к бизнес-информации — именно вы будете определять, кто и когда может пользоваться вашими файлами

Included

Included

Included

Создавайте политики паролей, чтобы обязать пользователей менять пароли через определенные промежутки времени

Included

Included

Included

Поддержка и развертывание

Поддержка и развертывание

Кнопка в заголовке для развертывания 4 строк таблицы ниже

Included

Included

Included

Пользуйтесь услугами круглосуточной поддержки по телефону и через Интернет

Included

Included

Included

Доступность в течение 99,9 % времени, подкрепленная финансовыми гарантиями, не оставит вам причин для беспокойства.

Included

Included

Included

Максимальное число пользователей

Лицензии для коммерческого использования

Included

Included

Included

Средства для развития бизнеса и управления им

Средства для развития бизнеса и управления им

Кнопка в заголовке для развертывания 5 строк таблицы ниже
Эта функция или возможность поддерживается частично

Included

Included

Microsoft Teams — приложение для управления расписаниями и координации повседневных задач

Included

Included

Microsoft Lists позволяет отслеживать информацию и контролировать задачи, наиболее важные для вашей команды

Microsoft Forms позволит собирать отзывы и предложения от клиентов и сотрудников

Включено

Включено

Включено

Microsoft Bookings поможет вашим клиентам назначать встречи с представителями компании и управлять ими

Included

Included

Установите приложение MileIQ и получайте в режиме реального времени точную информацию о пробеге5

Included

Included

Классические версии приложений Office для компьютеров Windows и Mac

Классические версии приложений Office для компьютеров Windows и Mac

Кнопка в заголовке для развертывания 2 строк таблицы ниже

Included

Included

Используйте полностью установленные и всегда актуальные версии Outlook, Word, Excel, PowerPoint, OneNote для ПК с Windows и компьютеров Mac (а также Access и Publisher только для ПК с Windows)

Included

Included

Устанавливайте приложения Office на пять ПК с Windows или компьютеров Mac для каждого пользователя1

Included

Included

Расширенная безопасность

Расширенная безопасность

Кнопка в заголовке для развертывания 7 строк таблицы ниже

Included

Защититесь от сложных угроз, скрытых во вложениях электронной почты и ссылках, и получите доступ к передовым средствам защиты от угроз нулевого дня, программ-шантажистов и других изощренных атак вредоносного ПО с Microsoft Defender для Office 365

Included

Дистанционно удаляйте корпоративные данные с потерянных и украденных устройств с помощью функции Selective Wipe в Intune

Included

Ограничьте копирование и сохранение корпоративной информации в посторонних приложениях и местах с помощью функции защиты мобильных приложений Office

Included

Контролируйте доступ к корпоративной информации с помощью ограничений типа «Не копировать» и «Не пересылать» на базе технологии управления правами на доступ к данным

Included

Применяйте политики Windows 10 для защиты от угроз еще до их проникновения в сеть с помощью функции Exploit Guard в Microsoft Defender

Included

Организуйте защиту от вредоносного ПО, чтобы обезопасить свои устройства на базе Windows 10 от вирусов, шпионских и других вредоносных программ с помощью Защитника Windows

Included

Получите доступ к неограниченному облачному хранилищу для архивирования и долгосрочным политикам сохранения, гарантирующим, что вы не потеряете ни одного электронного письма, с помощью службы Exchange Online Archiving

Included

Управление устройствами

Управление устройствами

Кнопка в заголовке для развертывания 5 строк таблицы ниже

Included

Настройте функции и параметры безопасности на компьютерах с Windows 10 и мобильных устройствах с iOS или Android®4 с помощью простого и удобного мастера настройки.

Included

Используйте упрощенные средства управления, чтобы контролировать политики на компьютерах с Windows 10

Included

Автоматически развертывайте приложения Office на ПК с Windows 10

Included

Настройте свои компьютеры для автоматической установки обновлений Office и Windows 10

Included

Применяйте политики безопасности для защиты корпоративных данных на всех устройствах, включая платформы iOS, Android®4 и Windows, с помощью средств управления мобильными устройствами от Intune

Included

Платформа Б, Распределённая блокчейн-платформа для хранения и обмена аккредитационных и KYC данных клиентов — ООО «СОЛАРЛАБ»

Описание платформы

Платформа децентрализованного хранения данных, позволяющая организовать надежный и безопасный обмен данными между конкурирующими организациями без введения в систему единого центра доверия.
Класс программного обеспечения: Средства обеспечения облачных и распределенных вычислений, средства виртуализации и системы хранения данных, Серверное и связующее программное обеспечение
Добавлен в единого реестра российских программ 11 Декабря 2017 Приказ Минкомсвязи России от 07.12.2017 №680
Альтернативные названия — Платформа Б, Распределённая блокчейн-платформа для хранения и обмена аккредитационных и KYC данных клиентов
Владелец — российская коммерческая организация ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ «СОЛАРЛАБ», Собственная разработка

Внедрения


Информация о внедрениях «Платформа Б, Распределённая блокчейн-платформа для хранения и обмена аккредитационных и KYC данных клиентов»
еще не добавлена

Сравнения


Информация о сравнении «Платформа Б, Распределённая блокчейн-платформа для хранения и обмена аккредитационных и KYC данных клиентов»
с другими решениями еще не сформирована

Совместимость


Информация о совместимости «Платформа Б, Распределённая блокчейн-платформа для хранения и обмена аккредитационных и KYC данных клиентов»
с другими решениями еще не добавлена
Дополнительная информация. Официальный сайт

Платформа для разработки мобильных бизнес-приложений – «Форсайт. Мобильная платформа»

Платформа для разработки мобильных бизнес-приложений – «Форсайт. Мобильная платформа»

«Форсайт. Мобильная платформа» помогает быстро развернуть удаленные рабочие места и безопасно интегрировать их в ИТ-инфраструктуру

Связаться с нами

Современный продукт на рынке Mobile Application Development Platform (MADP). Платформа обладает комплексным решением по информационной безопасности и универсальным инструментарием для быстрой и эффективной разработки защищенных мобильных приложений на основе популярных мобильных операционных систем (iOS, Android, Windows UWP, Win mobile, Win CE, Sailfish)

Внедрение решения позволит

Типы мобильных бизнес-приложений

Корпоративный сектор

Государственный сектор

Операционные

Менеджмент

Персонал

Внешние сервисы

Приёмка / отпуск материалов

ТОРО (техобслуживание, ремонты)

Инвентаризация товаров

Контроль складских запасов

Производственная безопасность — SecureVision

VIP — портал с аналитикой и КТ-отчетностью

Бизнес — анализ

Отчетность

СЭД

Ключевые показатели

Управление поставщиками

Управление акциями

Создание имиджа современного работодателя

Нефинансовая мотивация работников

Опросники, чек-листы для менеджеров

Обучение работников

Приём на работу и запрос справок

Ведение заместителей

Новости и Дни Рождения

Личный кабинет поставщика

Личный кабинет клиента

Мобильный портал закупок

Интеллектуальный голосовой государственный помощник

Согласование документов с применением электронно-цифровой подписи

Государственная организационная структура

Мобильная база данных приказов и распоряжений

Оформление заявок (отпуск, командировка, и пр. )

Учёт рабочего времени служащего

Персональные приоритеты развития

Повышение квалификации

ПРОДУКТ ПОМОГАЕТ РЕШИТЬ


СЛЕДУЮЩИЕ ЗАДАЧИ

Корпоративный сектор

Государственный сектор

Операционные

Менеджмент

Персонал

Внешние сервисы

  • Надёжная работа бизнес — процесса за счёт возможности кратковременной автономной работы мобильного приложения
  • Разграничение прав доступа к данным
  • Аутентификация пользователей в учётной системе, Active Directory, средствами мобильной платформы
  • Предварительная загрузка больших справочных данных по расписанию
  • Экономия на лицензиях учётной системы
  • Визуализация больших массивов данных
  • Дельта-кодированная передача
  • Передача документов и аналитических записок на мобильное устройство
  • Согласование с применением электронной подписи
  • Шифрование данных на мобильном устройстве
  • Разграничение прав доступа к данным
  • Защита персональных данных
  • Передача документов
  • Уведомление работников с помощью SMS, EMAIL, PUSH
  • Вовлечение клиентов, поставщиков, партнёров путём отправки им уведомлений SMS, PUSH
  • Интеграция с платёжными системами
  • Защита личной и корпоративной информации
  • Сбор аналитики действий пользователя, маршрутизация клиента
  • Годовое планирование (обучение, внутрихозяйственная деятельность)
  • Контроль финансов и бюджетов
  • Мониторинг показателей
  • Статусы и контроль выполнения
  • Взаимосвязь со СМИ

Преимущества продукта

Архитектура

Функциональные возможности

Реализованные проекты

Приложение для системы управления складом

КАМАЗ

Приложение автоматизирует складские процессы, позволяет выполнять: приёмку, пересчёт товара, адресное размещение.

Инспекция приборов учёта электроэнергии

ДТЭК

Мобильное приложение для проведения сверки электрических приборов учёта потребления электрической энергии.

Автоматизация процессов обхода и осмотра оборудования

ЕВРАЗ

Приложение позволяет увеличить качество обходов и осмотров оборудования, снизить нагрузку на персонал (ведение журналов дефектов), повысить точность принятия решения по оборудованию за счёт оперативного получения информации о состоянии оборудования и ускорить процесс планирования графиков обходов.

Подробнее

Корпоративная информационная система управления программами

Транснефть

Приложение позволяет визуализировать состояние инвестиционных проектов по множеству признаков и показателей.

Система управления товарными запасами

Лента

Приложение автоматизирует складские процессы, позволяет выполнять любые складские операции.

Подробнее

Мобильное приложение для роста производственной безопасности

ЕВРАЗ

С помощью приложения пользователь отправляет в базу данных по нарушениям промышленной безопасности фотографию, видео или текстовое сообщение, отражающее потенциально опасную ситуацию на производственной площадке. Сообщение об опасном участке получают риск-менеджеры и инициируют устранение угроз.

Подробнее

Мобильное приложение системы документооборота

ЕВРАЗ

Мобильная версия корпоративной системы документооборота. Приложение учитывает особенности информационных потоков и работы с документами в крупной компании, где в процессе подготовки и согласования документов участвует большое количество сотрудников.

Подробнее

Готовое мобильное приложение продукта «Форсайт. Аналитическая платформа» для планшетов на базе ОС iOS и Android, позволяющее анализировать дашборды и отчеты. Создано с применением технологий «Форсайт. Мобильной платформы».

Приложение дает возможность

  • Быстро подключаться к своим данным в любом удобном месте, в любое время и принимать взвешенные решения

  • Эффективно использовать обширный спектр визуализаторов для наглядного представления данных

  • Получать стабильный доступ к избранным сведениям с мобильных устройств благодаря надежной работе наших программных продуктов

  • Запрашивать необходимую информацию без риска потери данных

Техподдержка

Наши специалисты оказывают клиентам и партнерам компании комплексную техническую поддержку по всем вопросам эксплуатации программных продуктов. Для эффективной и успешной работы с нашими решениями вы можете воспользоваться различными сервисами поддержки.

Узнать больше

О «ФОРСАЙТЕ»

«Форсайт» – российский вендор, разработчик решений класса бизнес-аналитика. По итогам 2019 года компания «Форсайт» включена в топ-20 крупнейших российских разработчиков ПО (по данным «РАЭКС-Аналитика»), а также в топ-8 крупнейших поставщиков решений для анализа данных (согласно исследованию агентства CNews Analytics).

«Форсайт» разрабатывает BI-продукты, которые позволяют успешно решать аналитические задачи предприятиям и организациям из корпоративного, государственного и банковского секторов. В партнерскую экосистему компании входит более 50 российских ИТ-компаний.

Другие продукты и решения

Прогнозно-аналитические системы для организаций государственного, корпоративного и финансового секторов

Платформа для сотрудничества по налогам

Обзор

Платформа для сотрудничества в области налогообложения — это совместная работа, запущенная в апреле 2016 года Международным валютным фондом (МВФ), Организацией экономического сотрудничества и развития (ОЭСР), Организацией Объединенных Наций (ООН) и Группой Всемирного банка (ГВБ). ). Платформа предназначена для активизации сотрудничества между этими международными организациями (МО) по налоговым вопросам. Он формализует регулярные обсуждения между четырьмя МО по разработке и внедрению стандартов для международных налоговых вопросов, укрепляет их способность оказывать поддержку в наращивании потенциала развивающимся странам и помогает им предоставлять совместно разработанные руководства.Это также увеличивает их способность обмениваться информацией об оперативной и информационной деятельности по всему миру.

Эти усилия были предприняты в период большого импульса в области международных налоговых вопросов, и министры финансов G20 приветствовали их на встрече в Шанхае в феврале 2016 года. На фоне растущего значения налогообложения в дебатах по достижению Целей устойчивого развития (ЦУР) ООН, основная цель Платформы состоит в том, чтобы лучше сформулировать технические рекомендации для развивающихся стран, поскольку они стремятся как к большей поддержке потенциала, так и к большему влиянию при разработке международных правил.

Среди задач Платформы — выпуск ряда публикаций, предназначенных для помощи развивающимся странам в реализации мер, разработанных в рамках Проекта сокращения базы и перемещения прибыли Группы двадцати / ОЭСР (BEPS) среди других вопросов международного налогообложения. Между этой работой и Инклюзивной структурой BEPS существует важная связь. Члены платформы проводят регулярные встречи с представителями развивающихся стран, региональных налоговых организаций, банков и доноров. При необходимости организуются консультации с бизнесом и гражданским обществом.

Ознакомьтесь с отчетом «Платформа сотрудничества для сотрудничества в области налоговой деятельности за 2020 год» , чтобы ознакомиться с кратким обзором сотрудничества четырех ведущих мировых многосторонних организаций в области мобилизации внутренних ресурсов, в том числе в их ответах на COVID-19.

Секретариат РСТ пользуется щедрой поддержкой со стороны правительств Японии, Люксембурга, Нидерландов, Норвегии, Швейцарии и Великобритании.

Запуск нового сайта

В марте 2020 г. PCT запустил новый интегрированный веб-сайт, на котором представлена ​​обширная информация о том, как страны с низким и средним уровнем доходов могут укрепить налоговые системы и мобилизовать внутренние доходы, необходимые им для решения некоторых из насущных проблем развития, включая COVID-19 пандемия.Новый удобный веб-сайт содержит интерактивную базу данных, которая позволяет пользователям видеть — по каждой стране — самую последнюю информацию о налоговой деятельности четырех организаций. Он также предлагает наборы инструментов, публикации и практические советы по налоговым вопросам, в том числе новейшие ресурсы налоговой информации, связанные с реагированием на COVID-19. На этом веб-сайте отражена обширная и углубленная налоговая работа, которую четыре партнера провели по всему миру с момента создания РСТ в 2016 году.

ПОДРОБНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Посетите официальный сайт: www. tax-platform.org

Если у вас есть какие-либо вопросы, относящиеся к ОЭСР, вам предлагается написать по электронной почте [email protected]

Платформа для настроек конфиденциальности

PLING — Группа интересов языков политик W3C

3 октября 2007 г .: Группа по интересам языков политики (PLING) создан.Под председательством Марко Касасса-Монт (HP Labs) и Ренато Яннелла (НИКТА), группа уполномочена обсудить совместимость, требования и связанные потребности для интеграции и вычисление результатов, когда разные языки политики используются вместе, для например, OASIS XACML (расширяемый язык разметки управления доступом), общая политика IETF и P3P (платформа W3C для предпочтений конфиденциальности). Участие открыто для членов W3C и общественный .

Статус: P3P Работа приостановлена ​​

После успешного последнего звонка рабочая группа P3P решил опубликовать P3P 1.1 Спецификация в качестве примечания рабочей группы, чтобы дать P3P 1.1 предварительную конечное состояние.
Рабочая группа по спецификации P3P пошла на этот шаг, поскольку поддержка со стороны разработчиков текущего браузера для реализации P3P 1.1. Примечание рабочей группы P3P 1.1 содержит все изменения по сравнению с P3P 1.1 Last Call. Группа считает, что P3P 1.1 теперь готов к реализации. Не исключено, что W3C подтолкнет P3P 1.1 до Рекомендации при наличии достаточной поддержки выполнение.
С другой стороны, P3P продолжает оставаться основой ряда исследований. направления в области конфиденциальности во всем мире. Можно было бы сослаться на проект PRIME, а также на веб-сайт, посвященный политике. Много других подходы также следуют подходу описательных метаданных, начатому P3P. Такой проектам предлагается отправить электронное письмо на адрес , чтобы они были перечислены здесь.

Что такое P3P?

The Platform for Privacy Preferences Project (P3P) позволяет Веб-сайты, чтобы выразить свою политику конфиденциальности в стандартном формате, который может быть извлекаются автоматически и легко интерпретируются пользовательскими агентами.Пользователь P3P агенты позволят пользователям получать информацию о методах работы сайта (как на машинах) и удобочитаемые форматы) и автоматизировать принятие решений на основе этих при необходимости. Таким образом, пользователям не нужно читать политику конфиденциальности на каждый сайт, который они посещают. Взгляните на список программного обеспечения P3P.

Чем полезен P3P?

P3P использует машиночитаемые описания для описания сбор и использование данных. Сайты, реализующие такую ​​политику, делают свои явные методы и, таким образом, открывают их для общественного контроля.Браузеры могут помочь пользователю понять эти методы обеспечения конфиденциальности с помощью интеллектуальных интерфейсов. Наиболее что важно, браузеры могут таким образом развить предсказуемое поведение, когда блокирование контента, такого как файлы cookie, что дает реальный стимул сайтам электронной коммерции вести себя конфиденциально. Это позволяет избежать текущего разброса поведение по блокировке файлов cookie, основанное на индивидуальной эвристике, представленной разработчик инструмента блокировки, который сделает создание с отслеживанием состояния сервисы в Интернете — это боль, потому что получение состояния будет непредсказуемым.

Заметка Рабочей группы P3P 1.1

В P3P версии 1.1 внесен ряд изменений. Те должны быть обратно совместимы с P3P 1.0. Путь к достижению совместимость описана в Спецификации P3P 1.1. Самый значительный Краткое описание изменений приведено здесь:

  • Все исправления от P3P 1.0 включены в эту спецификацию.
  • В Разделе 1.3 определения: теперь предусмотрено идентифицированных, идентифицируемых, связанных, и связываемые данные
  • В разделе 2. 3.2.9 необязательный OUR-HOST Добавлен элемент для объявления домена отношения, позволяющие пользовательским агентам распознавать, когда хосты находятся в разных домены принадлежат одному и тому же субъекту или субъектам, выступающим в качестве агентов для одного еще один.
  • В Разделе 2.5 новый P3P Добавлен универсальный атрибут для XML-приложений. Это новый механизм привязки политик P3P к элементам XML, которые описывают интерфейсы, например, в XForms или WSDL.
  • В разделе 3.2.3 и Раздел 3.3.2 механизм был добавлено обозначение элементов P3P STATEMENT и группировка ЗАЯВЛЕНИЕ элементов вместе. Это позволяет пользовательским агентам лучше организовать сводное отображение политик P3P.
  • В Разделах 3.2.7 и 3.2.8 приведены новые определения. для элементов DISPUTES и REMEDIES и их подэлементы.
  • В Разделе 3.36 новое определение: предусмотрены для элемента RECIPIENT .
  • В Разделе 3.4 новое определение предоставляется для демографического элемента .
  • В Разделе 3.3.5.1 необязательный ppurpose Добавлен элемент , позволяющий пользовательским агентам чтобы определить основную причину, по которой получатель данных собирает данные.
  • В Разделе 3.3.6.1 необязательный JURSIDICTION Добавлен элемент для объявления юрисдикция получателей данных.
  • В разделе 4 язык был добавлено, чтобы объяснить использование компактных политик в качестве производительности оптимизации, и подчеркнуть их необязательный характер и неавторитетный статус.
  • В Разделе 4.2.10 новый синтаксис был добавлен для предоставления компактной версии ЗАЯВЛЕНИЯ элемент для использования в компактных полисах. Это позволяет создавать компактные политики, которые делают более детальные заявления о методах обработки данных чем это возможно с синтаксисом P3P 1. 0.
  • В Разделе 5 формат для указание схем данных P3P было существенно изменено, так что это теперь проще и стандартизирован, чем формат, используемый в P3P 1.0. в новом формате используется стандарт определения схемы XML (XSD), который может быть проверен по схеме XML. В Приложении 3 схема базовых данных P3P определение было обновлено, чтобы отразить это изменение.
  • В Разделе 6 новые инструкции по работе с пользовательскими агентами был добавлен в помощь разработчикам пользовательских агентов. Эти руководящие принципы включают набор простых языковых переводов элементов словарного запаса P3P.
  • Определение XML DTD для P3P было удалено из Технические характеристики.

Фон

P3P 1.1 является прямым следствием первого проведенного семинара по конфиденциальности 2002 г. в Даллесе, штат Вирджиния, и нацелены на краткосрочные улучшения, такие как Руководство по использованию агента пользователя.
Обсуждения долгосрочных целей были проведены в Киле во время второго семинара по долгосрочному будущему Веб-конфиденциальность - они были больше ориентированы на конфиденциальность в серверной части.
Большинство исследований, посвященных технологиям повышения конфиденциальности, сегодня на основе P3P. Они продвигают общую идею выразить политику конфиденциальности в машиночитаемый способ.Но они добавляют много недостающих функций. Персонал W3C участвует в двух проектах, заслуживающих упоминания:

PRIME - это Европейский исследовательский проект IST, который исследует будущее конфиденциальности. Управление идентификацией. Проект PRIME устраняет увеличивающийся разрыв между законы о конфиденциальности, с одной стороны, и «реальная жизнь» в сетях, с другой. передать комплексный подход к правовым, социальным, экономическим и технические зоны.

ТАМИ - это проект децентрализованной информации Группа, входящая в состав MIT's Computer Лаборатория науки и искусственного интеллекта.Проект ТАМИ - это создание технических, юридических и политических основ для прозрачности и подотчетность при крупномасштабной агрегации и выводе по разнородные информационные системы. Включение прозрачности и подотчетность в децентрализованных системах, таких как Интернет, имеет решающее значение для помощи общество управляет рисками конфиденциальности, возникающими в результате стремительного прогресса в технологии связи, хранения и поиска.

Сеть с учетом политик (PAW) - это система управления политиками на основе правил, которую можно развернуть в открытая и распределенная среда Всемирной паутины.Создает систему Инфраструктура Policy Aware для Интернета с использованием правил семантической сети язык (N3) с средством доказательства теорем, разработанным для Интернета (Cwm). Это разработан, чтобы включить масштабируемый механизм для обмена правилами и, в конечном итоге доказательства для контроля доступа в Интернете.

Платформа на основе VersaTile для быстрой разработки инженерных лизинов

Abstract

Органы здравоохранения призывают к созданию новых антибактериальных методов лечения, чтобы справиться с глобальным появлением устойчивых к антибиотикам бактерий.Лизины, кодируемые бактериофагами, представляют собой уникальный класс антибактериальных средств с многообещающим (доклиническим) прогрессом. Специальная инженерия лизинов позволяет создавать варианты против потенциально любого бактериального патогена. Здесь мы представляем высокопроизводительную платформу для разработки сконструированных лизинов. Платформа управляется VersaTile, новым методом сборки ДНК для быстрого создания комбинаторных библиотек сконструированных лизинов. Мы сконструировали около 10 000 вариантов лизина. Используя итеративную процедуру скрининга, мы идентифицировали ведущий вариант с высокой антибактериальной активностью против Acinetobacter baumannii в сыворотке крови человека и модель ожоговой раны свиньи ex vivo.Эта универсальная платформа может предложить новые возможности для заполнения доклинического конвейера модифицированными лизинами для различных (терапевтических) применений.

ВВЕДЕНИЕ

Быстрое появление и распространение бактерий с множественной и широкой лекарственной устойчивостью представляет собой серьезную угрозу общественному здоровью, которая еще более усугубляется отсутствием новых антибиотиков. Прогнозы, сделанные Всемирной организацией здравоохранения, показывают, что устойчивые к антибиотикам бактерии могут стать причиной более 10 миллионов смертей к 2050 году, тем самым превысив количество смертей, связанных с раком, если не будут приняты глобальные меры ( 1 ). Некогда успешная платформа Ваксмана по добыче природных антибиотиков из почвенных актиномицетов возвестила золотую эру открытия антибиотиков в 1940-1960-х годах. Однако платформа Ваксмана все чаще приводила к повторному открытию тех же классов антибиотиков ( 2 ). Уменьшение успеха побудило фармацевтическую промышленность к созданию новых платформ для открытий. С появлением геномики в 1990-х годах акцент сместился на высокопроизводительные кампании скрининга больших библиотек синтетических соединений против основных и консервативных бактериальных мишеней.Хотя соединения свинца были идентифицированы, они потерпели неудачу в условиях in vivo. Одна из основных причин - отсутствие проникновения в бактериальные клетки ( 3 ). Этот критический недостаток был наиболее выражен в случае грамотрицательных патогенов из-за их внешней мембраны ( 2 , 4 ). Такой подход привел к разочаровывающим и финансово неустойчивым результатам, что способствовало снижению интереса к открытию антибиотиков со стороны фармацевтической промышленности ( 4 ). Более 50 лет не вводились новые классы антибиотиков.

Следовательно, необходимы новые платформы для обнаружения ведущих антибактериальных препаратов с целью расширения ассортимента антибиотиков. Нетрадиционные подходы, которые отличаются от классических низкомолекулярных антибиотиков, все чаще рассматриваются как в качестве профилактических, так и в качестве терапевтических средств: антитела, пробиотики, природные и сконструированные бактериофаги, иммуностимуляция, вакцины, пептиды и лизины. Недавний обзор портфеля антибактериальных препаратов выявил семь (доклинических) проектов по лизину и подчеркнул необходимость дальнейших фундаментальных исследований для расширения терапевтических возможностей лизинов ( 5 ).Лизины представляют собой ферменты, расщепляющие пептидогликаны, продуцируемые (бактерио) фагами, включая эндолизины и связанные с вирионом пептидогликангидролазы (VAPGH). Из-за огромного количества фагов резервуар лизинов кажется неисчерпаемым, с кандидатами против любого потенциального патогена ( 6 ). Первые лизины, нацеленные на Staphylococcus aureus (CF-301, SAL200, P128 и Staphefekt ™), в настоящее время проходят клинические испытания ( 7 , 8 ). Учитывая типичные показатели отсева во время клинической оценки и для гарантированного преобразования в новые методы лечения разнообразных патогенов, желательно большее количество кандидатов для клинической оценки ( 5 ).Таким образом, необходима надежная и надежная платформа для обнаружения эффективных лизинов.

Хотя лизины дикого типа очень многообещающие, белковая инженерия предлагает множество возможностей для увеличения этого природного разнообразия. Направленная эволюция с помощью белковой инженерии привела к созданию лизинов с улучшенными характеристиками для их конкретного применения. Помимо мутагенеза, рекомбинация модульных доменов лизинов была, безусловно, самым популярным подходом, как недавно рассмотрено нашей группой ( 7 ).Рекомбинация доменов связывания клеточной стенки (CBD) и ферментативной активности (EAD) использовалась для изменения специфичности или для улучшения активности, стабильности и растворимости лизинов. Библиотека из 174 природных, рекомбинированных и усеченных вариантов лизинов и других бактериальных пептидогликангидролаз была проверена на оптимальную активность против S. aureus в молоке ( 9 ). Другая библиотека из 126 комбинаторных конструкций была использована для разработки химерного лизина с активностью против планктонных и биопленочных метициллин-устойчивых S.aureus ( 10 ). Чтобы расширить потенциал лизинов для уничтожения грамотрицательных патогенов, специфические пептиды, повышающие проницаемость внешней мембраны (OMP), были слиты с лизинами надлежащим образом для переноса через внешнюю мембрану, что привело к деградации и гибели пептидогликана из-за осмотического лизиса ( 11 - 14 ). Эти сконструированные лизины также известны как Artilysins® (Lysando AG). В предыдущем исследовании мы создали библиотеку из 49 вариантов, используя классические протоколы рестрикции-лигирования.Каждый вариант состоял из комбинации по меньшей мере одного OMP, линкера, одного CBD и одного EAD. Мы пришли к выводу, что каждый компонент влияет на антибактериальную активность, но необходимы дальнейшие эмпирические исследования, чтобы найти лучшую комбинацию для нацеливания на определенный вид ( 12 ).

На основе огромного разнообразия OMP, линкеров, CBD и EAD можно представить библиотеки гораздо более высокой сложности, нацеленные на любой патоген. Однако этому прогрессу препятствуют громоздкие, трудоемкие и трудоемкие молекулярные методы создания таких модульных библиотек, поскольку методы комбинаторной сборки негомологичных последовательностей (таких как OMP, линкеры, CBD и EAD) в открытой рамке считывания отсутствуют ( 15 ).Чтобы идентифицировать лучшие сконструированные лизины из практически бесконечного пространства последовательностей комбинаторно перетасованных лизинов, мы описываем здесь платформу для открытия для выполнения циклов проектирования, создания, тестирования и изучения сконструированных лизинов за короткий период времени. VersaTile продвигает эту платформу как новую технику для создания практически неограниченного количества перетасованных последовательностей лизина. Поскольку было создано невероятное количество вариантов, была реализована стратегия итеративного поиска, чтобы установить процесс разработки от первого лица, аналогичный ведущей разработке классических фармацевтических препаратов ( 16 ).В качестве доказательства концепции мы здесь демонстрируем использование этой платформы открытия для идентификации варианта лизина свинца с широкой активностью против штаммов Acinetobacter baumannii с множественной лекарственной устойчивостью в сыворотке крови человека. Мы дополнительно оценили этот вариант свинца на модели ex vivo ожоговой раневой инфекции, чтобы оценить его влияние на формирование биопленки на биологических поверхностях кожи. Созданная платформа носит общий характер и представляет собой платформу для открытий для выявления эффективных, сконструированных лизинов, нацеленных на широкий спектр патогенов.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Разработка платформы обнаружения для высокопроизводительного проектирования и тестирования лизинов

Платформа в основном состоит из трех этапов, которые можно итеративно повторять (рис. 1A): (i) проектирование и создание библиотеки сконструированных лизинов. использование VersaTile, (ii) параллельное экспрессирование сконструированных лизинов и тестирование их антимикробной активности, и (iii) обучение на основе результатов и определение взаимосвязей структура-активность. Эти отношения между структурой и активностью можно использовать для создания расширенной библиотеки с VersaTile в качестве входных данных для итеративных раундов скрининга.Чтобы оценить эффективность этого подхода, мы создали библиотеку из примерно 10 000 перетасованных лизинов для идентификации наиболее многообещающего варианта лизина, активного против грамотрицательного патогена A. baumannii в сыворотке крови человека.

Рис. 1. Итеративный трехэтапный подход к разработке, созданию, тестированию и анализу сконструированных лизинов.

( A ) Обзор трех этапов платформы обнаружения модифицированных лизинов. Эти шаги повторяются итеративно, чтобы получить вариант интереса, который соответствует критериям выбора. ( B ) Библиотека перетасованных вариантов создается с помощью VersaTile. Построен репозиторий плиток всех модулей (OMP, компоновщики, CBD и EAD). Каждый модуль клонируется в вектор pVTE, фланкируется позиционно-зависимыми тегами (обозначенными разными цветами) и сайтом распознавания BsaI. Сайт рестрикции BsaI расположен в позиционном теге. Все плитки из репозитория затем смешиваются по каждой позиции и объединяются с вектором pVTD для реакции комбинаторной сборки в одной пробирке. После трансформации каждый клон будет иметь разный набор плиток.( C ) Варианты выбирают случайным образом, экспрессируют и анализируют с помощью анализа ингибирования роста в сравнении с панелью из четырех изолятов в трех повторностях. Низкая оптическая плотность указывает на эффект ингибирования роста. ( D) На основе пропорционального обогащения определенных плиток идентифицированными совпадениями по сравнению с секвенированной библиотекой нанопор, извлекаются отношения структура-активность. Эти правила служат входными данными для следующего построения библиотеки с повторным использованием репозитория листов.

Объединение предыдущих знаний для разработки интеллектуальной библиотеки сконструированных лизинов

В ходе предыдущей работы над лизинами, нацеленными на грамотрицательные бактерии, было замечено, что как состав, так и особый порядок комбинированных модулей влияют на антибактериальную активность сконструированных лизинов.Наилучшие результаты были получены при использовании модульных лизинов, содержащих как CBD, так и EAD. Кроме того, промежуточный линкер имел положительный эффект, и наиболее активные варианты имели N-концевой OMP. Поэтому мы разработали библиотеку модульных вариантов с четырьмя позициями и следующей конкретной конфигурацией: OMP-linker-CBD-EAD. Выбранный порядок CBD-EAD напоминает естественную конфигурацию, которая наблюдается в нескольких модульных лизинах фагов, которые инфицируют грамотрицательные бактерии ( 12 ).Мы выбрали для каждой позиции 38 OMP, 2 линкера, 6 CBD и 21 EAD, соответственно (таблица S1).

Выбранные OMP различаются по длине (от 9 до 44 аминокислот), укладке (спиральная, пластинчатая и случайная спираль), катионности, гидрофобности и амфипатичности. Некоторые OMP были разработаны in silico, тогда как другие обладают ранее продемонстрированной активностью в отношении проницаемости внешней мембраны. Мы разработали два гибких линкера разной длины (6 и 14 аминокислот). Мы выбрали пять различных CBD из ранее охарактеризованных модульных лизинов (ΦKZ, EL, OBP, PVP-SE1 и 201phi2-1) ( 17 , 18 ).Все эти CBD напрямую нацелены на пептидогликан с хемотипом A1γ, типичным для грамотрицательных бактерий. Кроме того, мы включили мутагенизированный вариант CBD эндолизина ΦKZ, который больше не способен олигомеризоваться через дисульфидные мостики и который имеет более высокую термостабильность ( 11 ). Мы выбрали 21 различный EAD, происходящий из разнообразия фагов, инфицирующих грамотрицательные виды, и с различными биохимическими специфичностями (лизоцим, трансгликозилаза, амидаза и эндопептидаза). Мы использовали EAD как глобулярных, так и модульных эндолизинов (таблица S1).

VersaTile - эффективный метод быстрого создания больших комбинаторных библиотек лизинов.

VersaTile был разработан для устранения текущих технических ограничений для перетасовки модулей сконструированных лизинов с высокой пропускной способностью. VersaTile следует двухэтапному подходу. Во-первых, создается репозиторий всех модулей, называемых здесь плитками. Во-вторых, из этих плиток можно создать любую сборку направленным или случайным образом (рис.1Б). Следовательно, VersaTile - это метод сборки ДНК, подобный Lego, специально для модульных белков, таких как сконструированные лизины, которые не имеют гомологии ДНК.

Плитка определяется здесь как последовательность кодирования для определенного модуля (например, OMP, компоновщик, CBD или EAD), который сделан совместимым для использования с VersaTile. Следовательно, кодирующая последовательность фланкируется тегами с шестью нуклеотидами и сайтами узнавания BsaI, клонированными в специальный вектор входа (pVTE; фиг. S1). Всего для этого исследования мы создали репозиторий с 67 тайлами (таблица S1).Поскольку дизайн лизина состоит из четырех модулей (OMP-linker-CBD-EAD), тайлы, кодирующие OMP, специально помечены для позиции 1, тайлы, кодирующие линкеры для позиции 2, и т.д. (таблица S2). Расщепление BsaI в позиционных тегах генерирует позиционно-специфичные одноцепочечные выступы, которые соединяются для создания комбинаторных библиотек (циклическое расщепление и лигирование с использованием ДНК-лигазы BsaI и T4 соответственно) в выделенном векторе-приемнике (pVTD; рис. S1). Комбинаторная библиотека была построена со сложностью 9576 (= 38 × 2 × 6 × 21) вариантов путем объединения всех 38 плиток OMP, 2 линкера, 6 CBD и 21 плитки EAD в их соответствующих положениях (таблица S1).В полученных конструкциях соседние модули разделены шестинуклеотидным линкером, кодирующим две свободно выбранные аминокислоты. В этом исследовании использовались только глицин, аланин и серин (таблица S2). Ожидается, что эти гибкие аминокислоты не будут мешать автономному сворачиванию и функционированию модулей. Экспрессия последовательностей OMP-линкер-CBD-EAD в библиотеке управляется промотором Т7.

Стандартный анализ с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) и секвенирование по Сэнгеру случайно выбранных клонов показали правильную и случайную сборку с эффективностью ~ 95%.Для всесторонней оценки представления и случайности отдельных плиток в каждой позиции мы секвенировали 30 435 отдельных вариантов комбинаторной библиотеки с нанопорными технологиями, так как длинные чтения полностью охватывают собранные лизины. Мы извлекли счетчики чтения для каждого отдельного тайла и оценили порядок конкретного тайла, используя синтеническую информацию, содержащуюся в чтениях. Этот контроль качества библиотеки показал, что каждая отдельная плитка хорошо представлена ​​и может быть найдена в ожидаемом месте.Варианты подсчета были распределены логарифмически нормальным образом, и только 99 комбинаций не наблюдались в данных секвенирования без каких-либо конкретных моделей отсутствия (рис. S2).

Хиты идентифицируются посредством параллельного скрининга случайных вариантов на ингибирование роста

Мы реализовали параллельную экспрессию белка и оценку ингибирования роста для скрининга кандидатов-попаданий, присутствующих в комбинаторной библиотеке (рис. 1С). Esherichia coli BL21 (DE3) -RIL клетки трансформировали комбинаторной библиотекой, и случайным образом выбирали 380 клонов.Перетасованные гены лизина экспрессировали параллельно в 96-луночных планшетах. Использование аутоиндукционной среды обеспечивало индукцию экспрессии на одной и той же стадии роста всех клонов. Лизаты всех экспрессированных вариантов были получены путем воздействия на бактерии паров хлороформа. Полный лизис клеток подтверждался отсутствием жизнеспособных бактерий после нанесения на лизаты пятен.

Мы протестировали эти очищенные лизаты на ингибирование роста четырех различных штаммов A. baumannii с множественной лекарственной устойчивостью [10 6 колониеобразующих единиц (КОЕ) / мл].Семь вариантов (~ 2%) показали полное ингибирование роста по крайней мере одного штамма (таблица 1). В частности, вариант 1D9 полностью ингибировал все протестированных штаммов A. baumannii , тогда как вариант 1G7 был высокоактивен против трех штаммов. Остальные варианты полностью подавляли два штамма (1B11 и 1h5) или один штамм (1D1, 1A10 и 1h4) соответственно. A. baumannii NCTC 13423 оказался наиболее чувствительным штаммом, тогда как RUH 134 полностью ингибировался только одним вариантом.Таким образом, штаммы с множественной лекарственной устойчивостью демонстрировали переменную чувствительность. Пятна культур клеток после 24-часового воздействия этих вариантов подтвердили их бактерицидный эффект. Все варианты также проявляли муралитическую активность (таблица 1), но не наблюдали корреляции между муралитической и ингибирующей рост активностью.

Таблица 1 Характеристика семи совпадений, выбранных после первой отборочной кампании.

Модульная композиция, ингибирующая рост активности против четырех множественной лекарственной устойчивости A.baumannii , а муралитическая активность дана для вариантов, которые полностью подавляли рост по крайней мере одного штамма. Варианты ранжированы по эффекту ингибирования роста. Полная аннотация модулей доступна в таблице S1. Корреляции между активностью ингибирования роста и ферментативной активностью не наблюдается.

Активные сконструированные лизины показывают консервативные отношения структура-активность

Состав плитки из семи совпадений был определен путем секвенирования для поиска взаимосвязей структура-активность (Таблица 1).Некоторые плитки были более распространены в позиции 1 (OMP) и позиции 3 (CBD) (рис. 1D). В частности, четыре из семи активных вариантов содержат связанный с цекропином пептид (3 × OMP7; 1 × OMP11) в положении 1. Связанные с цекропином пептиды содержат консервативную α-спираль, прерванную шарниром (рис. S3) ( 19 ), что может быть признаком положительного эффекта, связанного с этим типом пептидов. Из шести возможных CBD присутствовали четыре. CBD2 и CBD6 присутствовали в двух наиболее активных попаданиях, соответственно, и также наиболее распространены (трехкратное и двукратное соответственно).Кроме того, CBD6 представляет собой мутагенизированное производное CBD1 лизина KZ144 ( 18 ), и ранее было показано, что он улучшает стабильность и активность в Art-175 ( 11 ). Не наблюдалось обогащения специфическим линкером или EAD.

Итерационный комбинаторный экран библиотеки приводит к увеличению соотношения сконструированных лизинов с улучшенной и более широкой эффективностью

На основе предполагаемых взаимосвязей структура-активность для позиций 1 и 3, вторая специализированная библиотека со сложностью 336 (4 × 2 × 2 × 21) вариантов был построен с использованием VersaTile, повторно используя плитки из репозитория (таблица S3).Для позиции 1 количество OMP было уменьшено с 38 до 4, включая только пептиды, связанные с цекропином (OMP6, OMP7, OMP10 и OMP11). Для позиции 3 были сохранены CBD2 и CBD6. Ряд из 188 клонов были отобраны случайным образом, экспрессированы и проанализированы на одной и той же тестовой панели штаммов с множественной лекарственной устойчивостью. Медианный эффект ингибирования роста был аналогичным для обеих библиотек, но распределение эффектов ингибирования роста сконструированных лизинов из второй библиотеки было стабильно более широким по сравнению с вариантами из первой библиотеки, как с более низкими, так и с более высокими вариантами (рис. 2А). При тех же критериях отбора, что и в первом цикле, 40 вариантов показали полную ингибирующую активность против по крайней мере одного штамма, что значительно увеличило процент попаданий с 2 ​​до 21% (40 из 188) ( P <0,001). Это очевидное увеличение доли активных сконструированных лизинов также сопровождается увеличением количества вариантов, которые полностью ингибировали четыре штамма, за счет вариантов, которые полностью ингибировали только один штамм (фиг. 2B и таблица S4).Оба наблюдения подтверждают, что одна или обе реализованные связи структура-активность эффективно способствуют более высокому проценту попаданий.

Рис. 2 Ростовая активность сконструированных лизинов из первой и второй библиотек.

( A ) График распределения активности ингибирования роста 380 вариантов (первая библиотека: синий) и 188 вариантов (вторая библиотека: зеленый) против четырех эпидемиологических штаммов A. baumannii . Обе библиотеки имеют одинаковое медианное значение, но вторая библиотека последовательно демонстрирует более широкое распределение с увеличенным числом как превосходных, так и низших вариантов. ( B ) Процент попаданий, подавляющих четыре штамма A. baumannii , увеличивается с 2 до 21%. Хиты второй библиотеки демонстрируют более широкую активность против протестированных штаммов A. baumannii , при этом более половины из них ингибируют все штаммы.

Был определен состав всех 40 совпадений (таблица S4). OMP7, то есть цекропин A из Aedes aegypti , является наиболее распространенным OMP с 31 из 40 случаев и присутствует исключительно в хитах с самой широкой активностью.Остальные хиты имеют OMP11, то есть саркотоксин IA из Sarcophaga peregrine , на первом месте. Два других связанных с цекропином OMP, которые были включены во вторую библиотеку, не попали в список попаданий. Линкер 1 (15 из 40) или линкер 2 (25 из 40) оба были хорошо представлены, тогда как CBD6 был чрезмерно представлен (32 из 40) по сравнению с CBD2 (8 из 40). Было идентифицировано шестнадцать различных EAD (из 21 EAD, включенных во вторую библиотеку), что демонстрирует гибкость в этой позиции. Тем не менее, EAD4 был самым распространенным - 6 из 40 случаев.

Идентификация свинцового варианта, активного против

A. baumannii в сыворотке человека

Наиболее активные варианты (24 из 40) против трех или четырех штаммов A. baumannii (таблица S4) не были показаны для проверки бактерицидной активности в более строгих условиях (50% сыворотки крови человека), чтобы лучше имитировать физиологические условия человека. Наиболее чувствительные и устойчивые штаммы A. baumannii (NCTC 13423 и RUH 134 соответственно) были обнаружены после 24-часового воздействия различных вариантов.Пять вариантов (21%) показали полное отсутствие выживших клеток в сыворотке крови человека, при этом один из них (1D10) полностью убил оба штамма (таблица S5). Этот сконструированный лизин (OMP7 – линкер 1 – CBD6 – EAD20) был окончательно выбран в качестве ведущего варианта.

Крупномасштабная экспрессия варианта свинца дала 22 мг на литр объема экспрессии после очистки с помощью аффинной хроматографии с никелем. Значения минимальной ингибирующей концентрации (МИК) варианта свинца против четырех эпидемиологических A.baumannii (таблица S6), разнообразный набор из 27 патогенных штаммов A. baumannii и 22 видов Acinetobacter , включая 34 изолята клинических ожоговых ран (таблица S7), варьировался от 4 до 24 мкг / мл (11,8 ± 5,2 мкг). / мл) ( 20 ). Добавление 0,2 мМ ЭДТА, который действует как хелатор двухвалентных катионов, присутствующих на внешней мембране, дополнительно снижает значения MIC до 2-20 мкг / мл (4,4 ± 3,6 мкг / мл). Количество бактерий четырех протестированных штаммов было уменьшено как минимум на 5 log (рис.3). Вариант свинца показал штамм-зависимую гибель в 90% сыворотке крови человека. При дозе 10 × МИК штамм NCTC 13423 был наиболее восприимчивым штаммом, достигнув 4,5-log уменьшения количества клеток через 30 мин, тогда как количество клеток штаммов LUH 5875, RUH 875 и RUH 134 уменьшилось между 2,4 и 2,7 лога соответственно. Включение 0,2 мМ ЭДТА немного увеличило логарифмическое сокращение клеток до 2,7-3,1 log соответственно ( P <0,05) (фиг. 3).

Инжир.3 Анализ времени уничтожения с ведущим вариантом против четырех протестированных штаммов A. baumannii в буфере и сыворотке человека.

Используемая концентрация варианта свинца составляет 1 × МИК в буфере и 10 × МИК в сыворотке человека в присутствии или в отсутствие 0,2 мМ ЭДТА. Все эксперименты в буфере достигли предела обнаружения анализа, а также все эксперименты с A. baumannii NCTC 13423. Каждая полоса представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. * P <0,05, тест Стьюдента t ; *** P <0.001, Студенческий тест t .

Вариант свинца замедляет рост бактерий и образование биопленки в ex vivo модели ожоговой раны эксплантата кожи свиньи.

Для моделирования роста бактерий и образования биопленки на ожоговых ранах была создана модель эксплантата кожи свиньи. Стандартизированное ложе ожоговой раны создавали на небольших кусочках свиной кожи, после чего инфицировали A. baumannii . После бактериальной адгезии ложе раны опрыскивали 50 мкг лизина. В целом, ведущий вариант может контролировать рост бактерий и образование биопленок у всех тестируемых штаммов после однократной обработки (рис.4А). Это ингибирование привело к снижению на 2,4-3,8 log единиц в модели ожоговой раны через 8 часов после обработки по сравнению с необработанным контролем. Это снижение было улучшено при использовании последовательных доз (через 2 и 4 часа после первого лечения). Наилучшие результаты были получены после применения тройной дозы (снижение на 4,8 до 5,1 логарифмических единиц через 8 часов после лечения). Антибактериальная активность свинцового варианта проявляется в течение первых 5 мин после нанесения белка со снижением на 3 и 2 log единицы по сравнению с A.baumannii RUH 134 и NCTC 13423 соответственно (рис. 4Б). A. baumannii RUH 134 стал наиболее чувствительным штаммом в этой модели инфекции ex vivo. Подобные результаты были получены в случае местной раневой инфекции без ожога (рис. S4).

Фиг. 4 Активность варианта свинца против A. baumannii, RUH 134 и NCTC 13423 на модели кожи свиньи ex vivo ожоговой раневой инфекции.

( A ) Данные представляют собой логарифм КОЕ на эксплант после обработки либо однократной дозой ведущего варианта (50 мкг) в момент времени 0 часов, либо двойной дозой белка (через 2 часа после первой дозы), либо тройной дозой. доза (через 2 и 4 часа после первой обработки).Контроль представляет собой количество бактерий без обработки белком. ( B ) Столбцы (синяя полоса: контроль, зеленая полоса: обработанная 1D10) представляют логарифм КОЕ на эксплант после однократной дозы белка (50 мкг; время 0 мин) в течение короткого периода времени (60 мин). . Значения соответствуют среднему значению ± стандартное отклонение для четырех повторов. Звездочки указывают статистические различия между контрольным и обработанным образцами ( P <0,05, тест Стьюдента t ). Предел обнаружения бактерий составляет 5 КОЕ на эксплант.

ОБСУЖДЕНИЕ

Необходимы новые платформы для открытия антимикробных препаратов, чтобы пополнить портфель антибиотиков в ответ на быстрое появление бактерий с множественной и устойчивостью к пандемиям. В то время как традиционная платформа Ваксмана исчерпала себя и страдает от повторного открытия, были разработаны альтернативные платформы для идентификации антимикробных (сконструированных) пептидов или антибиотиков из некультивируемых организмов ( 21 - 25 ). Недавний клинический прогресс до фазы 2 испытаний продемонстрировал многообещающие перспективы лизинов как широкого нового класса антибактериальных средств.Лизины могут быть идентифицированы против каждого патогена. Кроме того, они дополнительно разрабатываются, чтобы усилить их свойства для использования в качестве антибактериальных средств или сделать их активными против грамотрицательных бактерий ( 7 ). Однако до сих пор отсутствует эффективный высокопроизводительный подход к созданию и идентификации наиболее многообещающего модифицированного лизина. Представленный здесь подход сочетает в себе высокопроизводительную комбинаторную перетасовку модулей лизина с помощью VersaTile с параллельным и итеративным антибактериальным скринингом.Этот подход устанавливает непрерывный процесс разработки модифицированных лизинов, чтобы насытить конвейер новыми потенциальными кандидатами для доклинической оценки.

Разработка и реализация VersaTile позволяет генерировать большие комбинаторные библиотеки перетасованных сконструированных лизинов. В общем, метод, который позволял бы полную комбинаторную перетасовку независимым от гомологии способом, начиная с неограниченного числа родительских последовательностей, отсутствовал ( 15 ). Методом выбора для создания сконструированных лизинов уже давно является традиционное ограничение / лигирование.Этот подход является адекватным, но становится все более громоздким и трудоемким, когда необходимо объединить больше модулей или когда необходимо большое количество комбинаторно перетасованных вариантов ( 15 ). Самые большие зарегистрированные библиотеки сконструированных лизинов с использованием этих методов насчитывают 49, 126 и 174 варианта ( 9 , 10 , 12 ). Самые старые и наиболее часто используемые методы комбинаторной перетасовки основаны на гомологичной рекомбинации [например, перетасовке ДНК на основе дезоксирибонуклеазы (ДНКазы)], но не применимы для рекомбинации четко определенных негомологичных строительных блоков, таких как OMP, линкеры, CBD. , и EAD.Недавно были разработаны методы, не зависящие от гомологии, такие как ITCHY, SCRATCY, SHIPREC, SCOPE, SISDC и USERec ( 26 - 32 ), но лишь частично восполняют этот пробел, поскольку все они имеют свои специфические недостатки (например , комбинация только двух модулей, очень трудоемкая из-за нескольких PCR и невозможности высокопроизводительного комбинаторного перетасовки). VersaTile позволяет нам перетасовать неродственные последовательности ДНК рациональным или комбинаторным образом, используя врожденную способность рестрикционного фермента типа IIS направленно вырезать его сайт узнавания с возможностью свободного выбора сайта рестрикции, как в других методах, таких как Golden Gate перетасовка ( 33 ). В VersaTile эти сайты рестрикции встроены в теги с шестью нуклеотидами, которые кодируют гибкие аминокислоты, которые взаимодействуют с двумя модулями и, как ожидается, не будут мешать автономному сворачиванию и функционированию модулей. На основе предыдущих работ по разработке лизина в качестве небольших аминокислот были выбраны глицин, серин и аланин.

После создания репозитория тайлов первая библиотека из примерно 10 000 вариантов может быть создана за один день. Первоначальная частота совпадений 2% и обогащенные OMP и CBD обеспечили необходимые входные данные для создания второй библиотеки с повторным использованием плиток из существующего репозитория плиток.Скрининг этой второй библиотеки показал увеличение доли активных вариантов до более чем 21%, подтверждая положительный вклад (одного) реализованных правил проектирования. Наиболее активные сконструированные лизины из второй библиотеки были отобраны для тестирования их активности in vitro в сыворотке крови человека, имитируя физиологические условия. Это привело к идентификации 1D10, который снижает количество бактериальных клеток до 4,5 логарифмических единиц за 30 мин в сыворотке крови человека. Идентифицированный вариант обладает широкой ингибирующей активностью против видов Acinetobacter и предотвращает рост бактерий и развитие биопленок на модели кожной (ожоговой) раны свиньи ex vivo с A.baumannii.

На сегодняшний день другие (сконструированные) лизины или пептиды, полученные из лизинов, были использованы против A. baumannii , однако они либо не активны в ранах или сыворотке человека, либо не были протестированы ( 7 , 34 - 37 ). Некоторые нативные эндолизины против Pseudomonas aeruginosa активны в условиях низкого содержания сыворотки ( 38 ). Кроме того, лизоцин PyS2-GN4, гибрид пиоцина узкого спектра и домена лизина, активен в сыворотке человека с 4-логарифмическим снижением через 12 часов ( 39 ).Хотя вариант 1D10 появился в качестве ведущего кандидата из библиотеки с четко определенными правилами проектирования, состав последнего ведущего варианта был неожиданным. Хотя ранее было продемонстрировано, что его OMP активен против видов A. baumannii ( 40 ), его EAD происходит из gp16 фага BcepC6B. Последний представляет собой VAPGH, который локально разрушает слой пептидогликана во время инфекции и имеет ограниченную ферментативную активность по сравнению с фаговыми эндолизинами ( 41 ). Тем не менее, успех VAPGH можно рационально объяснить, поскольку VAPGH действует естественным образом извне и часто устойчив к более суровым внешним условиям (pH, температура, присутствие солей или компонентов комплемента, как в сыворотке крови человека) ( 42 - 45 ).

Поскольку мы проводили скрининг на ингибирующую рост активность очищенных лизатов, наблюдаемые эффекты ингибирования роста являются результатом комбинированного эффекта внутренней антибактериальной активности и выхода экспрессии в лизате. Из-за значительного разброса последовательностей среди различных модульных вариантов выход экспрессии также варьируется (рис. S5). Варианты, которые хорошо работают по обоим параметрам, окажутся на вершине рейтинга. В противном случае это также означает, что вариант с низким выходом экспрессии, но высокой внутренней активностью может оцениваться так же хорошо, как вариант с высоким выходом экспрессии, но с низкой внутренней активностью.В конечном итоге было показано, что свинцовый вариант 1D10 сочетает высокий выход экспрессии (22 мг / л) и высокую антибактериальную активность, в том числе в сыворотке крови человека. Обе функции удобны для доклинического анализа и позволят снизить возможные затраты на производство и очистку. Обратите внимание, что муралитическая активность не является показателем активности ингибирования роста (таблица 1). В то время как муралитическая активность в основном определяется комбинацией CBD-EAD, активность ингибирования роста также зависит от эффективности OMP для переноса фрагмента лизина через внешнюю мембрану.Кроме того, OMP также может частично вносить вклад в ингибирующую активность, как наблюдалось ранее ( 11 ).

Представленный подход носит общий характер и потенциально может быть применен к любой бактериальной мишени. Кроме того, можно исследовать каждую возможную конфигурацию (например, удвоение OMP или EAD, обратный порядок CBD / EAD, C- вместо N-концевого положения OMP и вариации линкера между CBD и EAD). Кроме того, VersaTile можно использовать для создания библиотек ДНК, которые кодируют варианты любого модульного белка, расширяя набор инструментов для белковой инженерии множеством возможностей.В то время как VersaTile устранил серьезное техническое препятствие в разработке лизинов, возникло следующее препятствие в производительности последующих анализов. Учитывая отсутствие методов для анализа всех ~ 10 000 вариантов, сокращенная траектория прослеживалась через пространство последовательностей, включающее все перемешанные варианты. Попадания с первого экрана случайно выбранных клонов направили нас к подгруппе пространства последовательностей, где был проведен более плотный поиск со второй библиотекой, чтобы в итоге оказаться как можно ближе к лучшему варианту без чрезмерных усилий по скринингу. Последовательности случайно выбранных клонов были раскрыты только после выбора совпадений с последующим извлечением взаимосвязей структура-активность между наблюдаемыми данными антибактериальной активности и последовательностями совпадений. В сочетании с технологией VersaTile можно использовать другую стратегию скрининга. Путем выполнения многочисленных параллельных реакций рациональной сборки, которые применялись при открытии лекарств с помощью комбинаторной химии, может быть создана комбинаторная библиотека с известным систематическим изменением для каждой позиции.На основе параллельного анализа антибактериальной активности этих вариантов, проведенного в данном исследовании, положительный или отрицательный вклад каждой плитки можно количественно рассчитать на основе известных последовательностей каждого варианта ( 46 - 47 ) . Хотя это требует дополнительных экспериментальных работ по конструированию библиотек и скринингу библиотек, варианты с еще более улучшенной антибактериальной активностью могут быть идентифицированы на основе этих количественных соотношений последовательность-функция. В конце концов, метод скрининга с пропускной способностью, которая может соответствовать сложности библиотеки, созданной VersaTile, позволит еще больше использовать преимущества VersaTile. Можно представить себе гораздо большие библиотеки. Каждую дополнительную плитку, которая будет добавлена ​​в репозиторий, можно объединить со всеми существующими плитками, например, если добавить одну плитку линкера, можно построить еще приблизительно 5000 сконструированных лизинов. Также могут быть разработаны другие конфигурации с другим порядком модулей, что быстро увеличивает общее количество вариантов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Штаммы бактерий и питательная среда

Все штаммы Acinetobacter , использованные в этом исследовании, и их источник показаны в таблице S7. Первоначальный набор из четырех штаммов включает контрольные эпидемиологические клоны Европейского Союза (ЕС), которые были обнаружены во всем мире и также называются всемирными клонами от I до III [I: RUH 875, II: RUH 134 и III: LUH 5875 ( 20 )]. Четвертый используемый штамм - это так называемый Иракибактер («штамм Т»: NCTC 13423, изолятор поля боя из жертв иракского конфликта) ( 48 ).Для хранения плазмиды и экспрессии белка использовали E.coli TOP10 и BL21 (DE3) -RIL (Agilent Technologies, Бельгия) соответственно. Все штаммы Acinetobacter (30 ° C) и E. coli (37 ° C) обычно выращивали в бульоне LB (1% триптона, 0,5% дрожжевого экстракта и 1% NaCl) при встряхивании (200 об / мин) или на LB с добавлением 1,5% агара. Для правильного отбора клонов E. coli в LB добавляли ампициллин (100 мкг / мл), канамицин (50 мкг / мл) и 5% (мас. / Об.) Сахарозу.

VersaTile: приготовление плиток

В зависимости от длины кодирующей последовательности плитку конструировали либо с помощью ПЦР с праймерами с расширенными 5'-последовательностями, либо с помощью генного синтеза [> 100 нуклеотидов (нуклеотидов)], либо генерировали гибридизацией кассеты праймеров (< 100 нт). Каждый праймер (Integrated DNA Technologies, Лёвен, Бельгия) содержал следующие необходимые части (перечисленные, начиная с кодирующей последовательности и далее): отдельный позиционный тег, сайт узнавания BsaI (для создания библиотеки) и сайт рестрикции и узнавания Sap I. (для строительства плитки).Все ферменты были от Thermo Fisher Scientific (Бельгия), если не указано иное. Для кассетной гибридизации праймеры смешивали в равных соотношениях (5 мкМ) и инкубировали при 95 ° C (5 мин) с последующим постепенным охлаждением до комнатной температуры (20 ° C). Затем одноцепочечные выступы заполняли ДНК-полимеразой Pfu (2,5 ед., 72 ° C, 10 мин). Последовательности (> 100 нуклеотидов) амплифицировали с помощью ДНК-полимеразы Pfu (2,5 ед.), Следуя инструкциям производителя, со 100 мкг геномной ДНК фага в качестве матрицы.

Затем кассеты праймеров и ампликоны лигировали в сайт sapI pVTE, используя следующий протокол: 100 нг pVTE, 50 нг кассеты ампликона / праймера, 2 мкл буфера ДНК-лигазы Т4, 15 Ед Т4. ДНК-лигаза и 10 ЕД Sap I в общем объеме 20 мкл. Химически компетентные клетки E.coli TOP10 трансформировали всей смесью для лигирования и высевали на 1,5% агар LB с добавлением ампициллина (100 мкг / мл) и 5% (мас. / Об.) Сахарозы. Новые плитки подтверждали секвенированием по Сэнгеру (LGC Genomics, Германия), и для каждой плитки готовили запасы 50 нг / мкл.

VersaTile: Подготовка комбинаторных библиотек

Для каждой позиции была приготовлена ​​смесь плитки, взяв 1 мкл 50 нг / мкл каждой выбранной плитки. Это повторяется отдельно для всех позиций 2, 3 и 4. Затем из каждой смеси плиток для определенного положения брали 1 мкл и смешивали с 1 мкл из других смесей плиток, ограниченных положениями 2, 3 и 4. Реакцию перетасовки VersaTile проводили с использованием следующего протокола: 1 мкл pVTD ( 100 нг / мкл), смесь плитки (4 мкл), 1 мкл BsaI (10 ед / мкл), 3 мкл ДНК-лигазы Т4 (1 ед / мкл) и 2 мкл буфера лигирования ДНК Т4 в общей реакции объем 20 мкл.Смесь инкубировали в термоциклере, используя следующую программу: (i) 2 мин при 37 ° C и (ii) 3 мин при 16 ° C; шаги 1 и 2 повторяются 50 раз, затем 5 минут при 50 ° C и, наконец, 5 минут при 80 ° C. Химически компетентные клетки E.coli BL21 (DE3) -RIL трансформировали всей смесью для лигирования и высевали на 1,5% агар LB с добавлением канамицина (50 мкг / мл) и 5% (мас. / Об.) Сахарозы.

Секвенирование нанопор и анализ последовательности комбинаторной библиотеки

Эта библиотека была секвенирована с использованием секвенатора MinION [Oxford Nanopore Technologies (ONT), Великобритания].Первоначально препарат плазмидной ДНК комбинаторной библиотеки был линеаризован с помощью рестрикционного фермента Ecl136ii в сайте, обнаруженном выше сайта клонирования и отсутствующем во всех конструкциях, кроме одной, в положении 4 (следовательно, не влияло на возможности обнаружения). Затем была приготовлена ​​ДНК с использованием метода одномерного (1D) лигирования ONT, метода без ПЦР, который сохраняет целостность молекул ДНК. Полученную библиотеку секвенировали на секвенаторе MinION, оборудованном R9.4.1 проточная кювета на 48 часов. Вызов оснований выполнялся для данных с использованием ONT Albacore v2.3.4, и полученные считывания были строго отфильтрованы для сопоставления (BWA-MEM) по всей их длине с исходным вектором pVTSD, за исключением области, замещенной продуктом реакции VersaTile ( 49 ). Впоследствии мы проанализировали эти замещенные области, используя локальное выравнивание с помощью инструмента иглы EMBOSS, чтобы проверить как порядок, так и тип плиток, из которых состоят конструкции ( 50 ).

Параллельная экспрессия белка и получение лизата.

Ночные культуры получали инокуляцией отдельных колоний в лунки 96-луночного планшета, каждая из которых была заполнена 500 мкл LB с канамицином (50 мкг / мл). Планшет покрывали лентой, обеспечивающей воздухообмен (Brand GmbH, Германия), и встряхивали (900 об / мин) при 37 ° C в течение 18 часов. Небольшой объем (15 мкл) из каждой лунки переносили в 96-луночный планшет, заполненный 500 мкл среды для автоиндукции на лунку ( 51 ).Эти планшеты инкубировали в течение 5 часов при 37 ° C (900 об / мин). Затем культуры инкубировали при 16 ° C в течение 48 часов. Клетки собирали центрифугированием (3200, г, , 30 мин, 4 ° C). Осадки, содержащие клетки, дополнительно лизировали путем воздействия паров хлороформа над фильтром, насыщенным хлороформом, в течение 1 часа при комнатной температуре. После этого планшет с глубокими лунками переворачивали для выпаривания остаточного хлороформа. Каждый лизат суспендировали в 500 мкл 20 мМ HEPES-NaOH, 150 мМ NaCl (pH 7.4) и 1 ед. ДНКазы I с последующей инкубацией при 30 ° C при 100 об / мин в течение 1 часа. После полного ресуспендирования гранул 5 мкл наносят на чашку с агаром LB для подтверждения полного лизиса бактерий. Затем лизаты очищали центрифугированием (3200 g , 45 мин, 4 ° C) и хранили при 4 ° C.

Ингибирование роста и муралитический анализ

Культуры Acinetobacter выращивали в бульоне Мюллера-Хинтона (MH) (Becton Dickinson, Бельгия) в течение 18 часов при 30 ° C. Затем культуры разводили в бульоне 2 × MH до OD 625 нм (оптическая плотность при 625 нм) = 0.1 (~ 5 × 10 8 КОЕ / мл). Из этой клеточной суспензии 50 мкл засевают в лунки микротитрационного планшета, а также 50 мкл очищенных лизатов. Мутность измеряется при 655 нм через 18 и 24 часа. Капли 5 мкл культур наносили на чашки с агаром LB для анализа бактерицидной активности. Для тестирования активности в сыворотке человека использовали тот же протокол, за исключением того, что культуры разводили в 100% сыворотке человека (MP Biomedicals, Бельгия). Через 24 часа суспензии разбавляли 20 мМ HEPES-NaOH и 150 мМ NaCl (pH 7.4) и высыпали на чашки с агаром LB.

Субстрат для муралитического анализа получали, как описано ранее ( 52 ). Вкратце, P. aeruginosa PAO1 выращивают в течение ночи при 37 ° C в орбитальном шейкере. На следующий день свежие LB инокулируют ночной культурой и культуру выращивают до OD 600 нм = 0,6. Культуру центрифугируют и ресуспендируют в буфере, насыщенном хлороформом [0,05 М трис-HCl (pH 7,7) и хлороформ]. Ресуспендированный раствор осторожно встряхивают ровно 45 мин.Раствор дважды промывают фосфатно-солевым буфером (PBS; pH 7,4) (OD 600 нм = ± 1,5). Объем 270 мкл субстрата смешивают с 30 мкл очищенного лизата. Поглощение (OD , 600 нм, ) измеряют каждые 30 с в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем муралитическую активность рассчитывали с использованием стандартизированного метода расчета ( 52 ).

Крупномасштабная экспрессия и очистка белка

Рекомбинантную экспрессию выбранных хитов выполняли, как описано ранее ( 11 ).Свежие клетки [ E.coli BL21 (DE3) -RIL] инокулировали в 0,5 литра среды LB и выращивали при 37 ° C до OD 600 нм = 0,5-0,6. Экспрессию индуцировали 1 мМ изопропил-β-d-тиогалактопиранозидом (IPTG) при 16 ° C в течение 18 часов. Клетки E. coli лизировали в 20 мл буфера для лизиса [20 мМ NaH 2 PO 4 / Na 2 HPO 4 , 0,5 М NaCl и 50 мМ имидазол (pH 7,4)] замораживанием. -оттаивание и обработка ультразвуком (Q125, Qsonica) на льду. Лизаты очищали (16000 г ; 20 мин) и фильтровали (поливинилидендифторид, 0.Размер пор 22 мкм; Новолаб, Бельгия). Растворимый белок очищали на колонках His GraviTrap (GE Healthcare, Бельгия) в соответствии с инструкциями производителя. Очищенный лизин подвергали диализу против 20 мМ HEPES-NaOH и 500 мМ NaCl (pH 7,4), а затем против 20 мМ HEPES-NaOH и 150 мМ NaCl (pH 7,4), используя Slide-A-Lyzer MINI Dialysis Devices (Thermo Fisher Scientific, Бельгия). ). Концентрацию белка определяли спектрофотометрически.

Time-kill assay

Стационарную фазу культуры соответствующего штамма разводили (1:10) и инкубировали при 30 ° C (200 об / мин) до средней экспоненциальной фазы (OD 600 нм = 0.6). Суспензию клеток трижды промывали 20 мМ HEPES-NaOH и 150 мМ NaCl (pH 7,4) и разбавляли в 100 раз 20 мМ HEPES-NaOH и 150 мМ NaCl (pH 7,4) (~ 10 6 КОЕ / мл). . Клеточную суспензию 100 мкл инкубировали при комнатной температуре с 50 мкл диализованного лизина и 50 мкл 20 мМ HEPES-NaOH и 150 мМ NaCl (pH 7,4) с / без 0,2 мМ EDTA. Конечную концентрацию ведущего варианта (1D10) доводили для каждого штамма до 1 × MIC. Через 30 мин разведения клеток высевали в трех экземплярах (30 ° C).Антибактериальная активность определялась количественно как относительный уровень инактивации в логарифмических единицах [log 10 ( N 0 / N i ), с N 0 = исходное количество необработанных клеток и N i = количество остаточных клеток после обработки]. Анализы «убивающего по времени» в сыворотке проводили аналогичным образом. Объемы были скорректированы для достижения 90% сыворотки крови человека, и 10 × MIC использовали вместо 1 × MIC в качестве конечной концентрации варианта свинца (1D10).

Анализ MIC

Представляющие интерес бактерии выращивали в течение ночи в бульоне MH (30 ° C, 200 об / мин). Затем ночную культуру разбавляли 1:10 и выращивали до OD 600 нм = 0,6 с последующим 5000-кратным разведением в бульоне MH (~ 2 × 10 5 КОЕ / мл). Диализованный лизин [20 мМ HEPES-NaOH и 150 мМ NaCl (pH 7,4)] добавляли к суспензии клеток с конечной концентрацией в диапазоне от 0 до 20 мкг / мл с шагом 2 мкг / мл, с 0,2 мМ EDTA и без него. Бланк и контроли включали интересующую бактерию без белка и без ЭДТА и неинокулированный бульон.Планшет инкубировали в течение 18 часов при 30 ° C, и MIC определяли как самую низкую концентрацию, которая давала полное ингибирование роста.

Модель эксплантата кожи свиньи (ожоговая) раневая инфекция

Чтобы проверить способность свинцового варианта (1D10) уменьшать развитие бактериальной биопленки, мы использовали модель раневой инфекции, описанную ранее с некоторыми модификациями ( 53 ). Вкратце, свиная кожа была получена в Центре минимально инвазивной хирургии Хесус Усон (Касерес, Испания).Кожу осторожно сбривали ножницами и бритвами. Кроме того, кожу дополнительно очищали 70% -ным изопропиловым спиртом и давали высохнуть при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем эксплантаты кожи были получены путем разрезания 1 см × 1 см. Ложе раны было создано, как описано ранее ( 51 ), с использованием ручного высокоскоростного сверла с высокоскоростной круглой фрезой диаметром 4,8 мм (Dremel # 192). Это постоянно образует центральное «ложе раны» диаметром 4,8 мм и глубиной 1 мм. С другой стороны, для создания ожоговой раны нужен инструмент из нержавеющей стали с плоским концом 4.Диаметр 8 мм. Для создания «ложа ожоговой раны» конец инструмента обжигали в течение 30 с, а затем штамповали на кожный эксплантат на 2 с. Немедленно все кожные эксплантаты с раной или ожоговой раной стерилизовали погружением в 70% этанол с последующей промывкой в ​​физиологическом растворе (0,9% NaCl, pH 5,5) и, наконец, стерилизацией ультрафиолетом в течение 10 мин. Затем стерильные эксплантаты переносили в 24-луночные планшеты, заполненные 1 мл физиологического раствора (0,9% NaCl, pH 5.5) с добавлением 0,5% агара для имитации состояния человеческого тела.

Для приготовления бактериального инокулята штаммов A. baumannii выращивали в встряхиваемом бульоне LB при 30 ° C. Затем бактерии разбавляли до конечной концентрации 10 6 КОЕ / мл в 20 мМ HEPES-NaOH и 150 мМ NaCl (pH 7,4). Затем 10 мкл этого разведения добавляли к ране или ложе ожоговой раны (~ 10 4 КОЕ на эксплант) в двух экземплярах (четыре экспланта на штамм на точку отбора проб). Затем бактериям давали прилипнуть, инкубируя 15 мин при комнатной температуре.Наконец, на кожу распыляли 100 мкл диализованного лизина (конечная концентрация 50 мкг на эксплант). Образцы, соответствующие моменту времени 0, обрабатывали сразу после распыления. Остальные образцы инкубировали при 37 ° C с 0,5% CO 2 . Кроме того, некоторые образцы обрабатывали белком дважды (обработка двойной дозой, через 2 часа после первой обработки) или трижды (через 4 часа после первой обработки). HEPES-NaOH (20 мМ) и NaCl (150 мМ, pH 7,4) использовали в качестве контроля нелеченой инфекции.В каждый момент времени отбирали образцы и добавляли 1,5 мкл протеиназы К для инактивации белка. Каждый эксплант в условиях асептики переносили в мешок для стоматологии (BagPage, BagSystem, Interscience, St-Nom-la-Breteche, Франция), содержащий 5 мл PBS (pH 7,4), и гомогенизировали в течение 90 с в стоматологическом мешке (модель 80, Seward Medical, Лондон, Великобритания). После гомогенизации разведения высевали на чашки с агаром LB. Планшеты инкубировали при 30 ° C в течение 16 часов. Каждая временная точка состоит из двух биологических повторений и двух технических повторений с использованием двух разных эксплантатов кожи.

Гомологическое моделирование OMP, присутствующих в активных сконструированных лизинах в первом раунде скрининга

Для прогнозирования трехмерной структуры OMP, которые присутствовали в активных сконструированных лизинах после первого раунда скрининга, мы использовали Iterative Threading ASSEmbly Refinement с стандартные параметры ( 19 ).

Статистический анализ

Данные, полученные в тестах активности in vitro (анализы с ограничением по времени и анализы MIC), выражали как среднее ± стандартное отклонение для трех повторов.Для модели ex vivo раневой и ожоговой инфекции данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для четырех повторов. Во всех случаях тест Стьюдента t использовали для сравнения различий между обработанными и необработанными бактериальными культурами на уровне значимости P <0,05 (программа SPSS-PC + 11.0, Чикаго, Иллинойс, США). Хи-квадрат Пирсона с точным критерием Фишера использовался для сравнения разницы в частоте совпадений между первой и повторной комбинаторной библиотекой на уровне значимости P <0.001 (программа SPSS-PC + 11.0, Чикаго, Иллинойс, США). Эмпирическое распределение тайлов, полученных с помощью секвенирования нанопор, было проанализировано с помощью пакета fitdistrplus (X) ( 54 ) с использованием функции chisq. test, доступной в статистической среде R ( 55 ), для сравнения с моделированным логарифмически нормальным распределением. ( P > 0,05).

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution, которая разрешает использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что конечное использование составляет , а не для коммерческих целей и при условии, что оригинальная работа правильно процитирована.

ССЫЛКИ И ПРИМЕЧАНИЯ

  1. 900
  2. AK Udit, JJ Silberg, V. Sieber, в Создание библиотеки направленной эволюции: методы и протоколы (Humana Press, 2003), стр. 153–163.

  3. NJ Saez, R. Vincentelli, Высокопроизводительный скрининг экспрессии и очистка рекомбинантных белков в E. coli, в Structural Genomics. Методы молекулярной биологии , Ю.Чен, Эд. (Humana Press, 2014), т. 1091.

Благодарности: Мы благодарим J.-P. Pirnay и L.V. Peixe за предоставление штаммов Acinetobacter . Мы благодарим I. Staes и J. Verwaeren за их помощь в разработке рисунков и статистики, соответственно. Финансирование: Эта работа была поддержана Исследовательским фондом Фландрии (FWO) в рамках стратегического финансирования стипендии SB (1S32217N и 1S64718N) и «Krediet aan Navorsers» (FWOKAN2015002001). Вклад авторов: Х.Г., Дж. Л., Я. Б. и Р. Л. разработали эксперименты. H.G., D.Gr., R.L. и Y.B. разработан VersaTile. H.G. и D.Gr. сгенерированы все плитки. Х.Г. провела как просмотр, так и характеристику ведущего варианта. D.Gu. и А. провели ex vivo эксперименты с кожей свиньи. C.L., R.L. и V.-v.N. выполнили секвенирование и анализ нанопор. Х.Г., Д.Г., Ю.Б. написал газету. Все остальные авторы предоставили отзывы о рукописи. Конкурирующие интересы: Ю. выступал в качестве научного консультанта Lisando GmbH.H.G., D.Gr., R.L. и Y.B. являются изобретателями в патентной заявке, связанной с этой работой, поданной Гентским университетом и Левенским университетом (№ WO / 2018/114980, подана 19 февраля 2017 г., опубликована 28 июня 2018 г.). Авторы заявляют, что у них нет других конкурирующих интересов. Доступность данных и материалов: Все данные, необходимые для оценки выводов в статье, представлены в документе и / или дополнительных материалах. Дополнительные данные, относящиеся к этой статье, могут быть запрошены у соответствующего автора.Векторы VersaTile могут быть предоставлены Y.B. для академических исследований, ожидающих научной экспертизы, и заключенного соглашения о передаче материалов. Запросы на векторы VersaTile следует отправлять по адресу: yves.briers {at} ugent.be.

  • Copyright © 2020 Авторы, некоторые права защищены; эксклюзивный лицензиат Американской ассоциации содействия развитию науки. Нет претензий к оригинальным работам правительства США. Распространяется по некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution 4.0 (CC BY-NC).

Платформа вопросов и ответов Palantir для инвесторов открыта на все выходные перед отчетом о доходах во вторник

TipRanks

Goldman Sachs: эти 2 акции «сильной покупки» могут вырасти как минимум на 30%

Мы находимся в первом квартале Сейчас 2021 год, и сейчас хорошее время, чтобы подвести итоги того, что стоит за нами, и как это повлияет на то, что нас ждет впереди. Стратег Goldman Sachs Ян Хациус считает, что мы находимся на восходящей траектории, и впереди нас ждут лучшие времена. Хациус считает, что развитые экономики расширяются по мере отступления коронного кризиса. В США, в частности, он впечатлен «очень существенной фискальной поддержкой», предусмотренной в последнем пакете помощи в связи с COVID. Однако даже с учетом этого Хациус считает, что четвертый квартал был более слабым периодом, и мы все еще не совсем из него. Он оценивает рост в 1 квартале на уровне 5% и говорит, что мы увидим дальнейшее расширение, «сконцентрированное на весне», и «ускорение темпов роста до 10% во 2 квартале».«И под ускорением, Хациус означает, что инвесторы должны ожидать ВВП во втором квартале около 6,6%. Хациус связывает этот прогноз с продолжающимися программами вакцинации и продолжающейся разработкой вакцин против COVID. Вакцины Moderna и Pfizer уже находятся в производстве и обращении. Хациус говорит об этих программах: «Тот факт, что мы разрабатываем больше вариантов, и что у правительств по всему миру будет больше возможностей для выбора между различными вакцинами, [означает], что производство, вероятно, резко возрастет в ближайшие месяцы. … Это определенно основная причина нашего оптимистичного прогноза роста.«Помимо взгляда Хациуса на макроэкономическую ситуацию, аналитики Goldman Sachs также углубились в анализ конкретных акций. Используя базу данных TipRanks, мы определили две акции, которые, по прогнозам компании, продемонстрируют устойчивый рост в 2021 году. Остальная часть Стрит также поддерживает оба тикера, каждая из которых имеет консенсус-рейтинг «Сильная покупка». Stellantis (STLA) Мы уже говорили об автопроизводителях Детройта, и это правильно - они являются основными игроками на экономической арене США. Но у США нет монополии в автомобильном секторе, что доказала голландская компания Stellantis.Этот международный конгломерат является результатом слияния французской Groupe PSA и итало-американской Fiat-Chrysler. Сделка заключалась в соглашении о 50 на 50 акций, и Stellantis может похвастаться рыночной капитализацией, превышающей 50 миллиардов долларов, и портфелем почти легендарных табличек с именами, включая Alpha Romeo, Dodge Ram, Jeep и Maserati. Сделка, которая сформировала Stellantis, в настоящее время четвертого по величине производителя автомобилей в мире, заняла 16 месяцев после того, как о ней было впервые объявлено в октябре 2019 года. Теперь, когда это реальность - слияние было завершено в январе этого года - объединенная компания обещает затраты экономия почти 5 миллиардов евро на операциях Fiat-Chrysler и PSA.Эту экономию можно реализовать за счет повышения эффективности, а не за счет закрытия и сокращения производства. Stellantis - новинка на рынке, а тикер STLA вытеснил FCAU Fiat-Chrysler на Нью-Йоркской фондовой бирже, дав новой компании легендарную историю. Стоимость акций компании выросла почти втрое по сравнению с минимальной отметкой, достигнутой в марте прошлого года во время «коронной рецессии», и остается высокой после завершения слияния. Аналитик Goldman Sachs Джордж Галльерс оптимистично оценивает будущее Stellantis, написав: «Мы видим четыре движущих фактора, которые, на наш взгляд, позволят Stellantis работать. 1) Портфели продуктов PSA и FCA в Европе охватывают сегменты аналогичного размера по аналогичным ценам… 2) Дополнительная экономия от масштаба потенциально может оказать существенное влияние на обе компании ... 3) Обе компании находятся на относительно начальной стадии [в] электроэнергетике. автомобильные программы. Слияние предотвратит дублирование и обеспечит синергию. 4) Наконец, мы видим некоторые возможности вокруг центрального персонала, где существующие функции, вероятно, могут быть консолидированы ... »В соответствии с этим прогнозом Галлье оценивает STLA как« Покупать », а его целевая цена в 22 доллара указывает на возможность роста на 37% в предстоящем году.(Чтобы посмотреть послужной список Galliers, щелкните здесь) В целом это слияние вызвало много шума, и на Уолл-стрит широко распространено мнение о том, что объединенная компания принесет прибыль. STLA имеет консенсус-рейтинг «Сильная покупка», основанный на 7 единогласных обзорах покупателей. Акции оценены в 16,04 доллара, а средняя цель в 21,59 доллара совпадает с прогнозом Галлье, что предполагает потенциал роста на 34,5% в течение одного года. (См. Анализ запасов STLA на сайте TipRanks) NRG Energy (NRG) Из автомобилестроения мы переходим в энергетический сектор.NRG - поставщик коммунальных услуг с оборотом 10 миллиардов долларов с двумя головными офисами в Техасе и Нью-Джерси. Компания обеспечивает электроэнергией более 3 миллионов потребителей в 10 штатах и ​​округе Колумбия и может похвастаться генерирующей мощностью более 23 000 МВт, что делает ее одной из крупнейших электроэнергетических компаний Северной Америки. Производство NRG включает угольные, нефтяные и атомные электростанции, а также ветряные и солнечные фермы. В своем последнем квартальном отчете за 3 квартал 2020 года NRG показала общую выручку в размере 2,8 миллиарда долларов, а также 1,02 доллара на акцию на акцию. Несмотря на снижение по сравнению с прошлым годом, этого было более чем достаточно для поддержания стабильной и надежной выплаты дивидендов компании f 32.5 центов за обыкновенную акцию. Это составляет 1,30 доллара на обыкновенную акцию в годовом исчислении и дает доходность 3,1%. Аналитик Майкл Лапидес в своем обзоре акций Goldman Sachs оценивает NRG как "Покупать". Его целевая цена в 57 долларов предполагает потенциал роста на 36% от текущих уровней. (Чтобы посмотреть послужной список Лапидеса, щелкните здесь). Отмечая недавнее приобретение Direct Energy, Лапидес говорит, что он ожидает, что компания сократит долю заемных средств в ближайшем будущем. «После приобретения NRG компании Direct Energy, одного из крупнейших розничных продавцов электроэнергии и природного газа в США, мы считаем, что бизнес NRG несколько изменился.«Интегрированная бизнес-модель - владение оптовыми торговыми предприятиями по производству электроэнергии, которые поставляют электроэнергию, которая используется для обслуживания потребителей, поставляемых конкурентоспособным розничным подразделением NRG, - сокращает влияние торговых рынков электроэнергии и цен на сырьевые товары, одновременно увеличивая потенциал свободного денежного потока», - написал Лапидес. Мы рассматриваем 2021 год с точки зрения распределения капитала как год сокращения доли заемных средств, но с учетом того, что NRG будет генерировать почти 2 млрд долларов США в год в свободном денежном потоке, мы ожидаем роста выкупа акций, а также роста дивидендов на 8% в 2022–2023 годах. «Мы смотрим на еще одну акцию с консенсус-прогнозом аналитиков« Сильная покупка ». Эта оценка основана на соотношении 3: 1 между оценками« покупать »и« держать ». NRG торгуется по 41,84 доллара, а его средняя целевая цена в 52,75 доллара предполагает потенциал роста на 26%. (См. анализ акций NRG на сайте TipRanks). Чтобы найти хорошие идеи для торговли акциями по привлекательной оценке, посетите недавно выпущенный инструмент TipRanks «Лучшие акции для покупки», который объединяет все аналитические данные TipRanks по акциям. : Мнения, выраженные в этой статье, принадлежат исключительно упомянутым аналитикам.Контент предназначен для использования только в информационных целях. Прежде чем делать какие-либо инвестиции, очень важно провести собственный анализ.

Fiji: платформа с открытым исходным кодом для анализа биологических изображений

  • 1

    Turing, A.M. Химические основы морфогенеза. 1953. Bull. Математика. Биол. 52 , 153–197, обсуждение 119–152 (1990).

    CAS Статья Google ученый

  • 2

    Альтшул, С.Ф., Гиш, В., Миллер, В., Майерс, Э. В., Липман, Д. Дж. Базовый инструмент поиска локального выравнивания. J. Mol. Биол. 215 , 403–410 (1990).

    CAS Статья Google ученый

  • 3

    Myers, E.W. et al. Полногеномная сборка Drosophila . Наука 287 , 2196–2204 (2000).

    CAS Статья Google ученый

  • 4

    Нейман, Б.и другие. Фенотипическое профилирование генома человека с помощью покадровой микроскопии выявляет гены деления клеток. Nature 464 , 721–727 (2010).

    CAS Статья Google ученый

  • 5

    Collinet, C. et al. Системное обследование эндоцитоза методом многопараметрического анализа изображений. Nature 464 , 243–249 (2010).

    CAS Статья Google ученый

  • 6

    Шариф, А., Кангас, Дж., Коэльо, Л.П., Куинн, С., Мерфи, Р.Ф. Автоматический анализ изображений для просмотра и анализа высокого содержания. J. Biomol. Экран. 15 , 726–734 (2010).

    Артикул Google ученый

  • 7

    Megason, S.G. & Fraser, S.E. Визуализация в системной биологии. Cell 130 , 784–795 (2007).

    CAS Статья Google ученый

  • 8

    Келлер, П.J., Schmidt, A.D., Wittbrodt, J. & Stelzer, E.H. Реконструкция раннего эмбрионального развития рыбок данио с помощью сканирующей световой микроскопии. Наука 322 , 1065–1069 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 9

    Fowlkes, C.C. и другие. Количественный пространственно-временной атлас экспрессии генов в бластодерме Drosophila . Cell 133 , 364–374 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 10

    Андерсон, Дж. R. et al. Вычислительная основа для ультраструктурного отображения нейронных схем. PLoS Biol. 7 , e1000074 (2009).

    Артикул Google ученый

  • 11

    Заальфельд, С., Кардона, А., Хартенштейн, В. и Томанчак, П. Максимально жесткая мозаика и регистрация последовательных секций больших наборов данных ssTEM. Биоинформатика 26 , i57 – i63 (2010).

    CAS Статья Google ученый

  • 12

    Мюррей, Дж.I. et al. Автоматический анализ экспрессии эмбриональных генов с клеточным разрешением в C. elegans . Nat. Методы 5 , 703–709 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 13

    Fernandez, R. et al. Визуализация роста растений в 4D: надежная реконструкция тканей и клонирование при разрешении клеток. Nat. Методы 7 , 547–553 (2010).

    CAS Статья Google ученый

  • 14

    Бао, З.и другие. Автоматическое отслеживание клонов клеток в Caenorhabditis elegans . Proc. Natl. Акад. Sci. США 103 , 2707–2712 (2006).

    CAS Статья Google ученый

  • 15

    Long, F., Peng, H., Liu, X., Kim, S.K. И Майерс, Э. Трехмерный цифровой атлас C. elegans и его применение для анализа отдельных клеток. Nat. Методы 6 , 667–672 (2009).

    CAS Статья Google ученый

  • 16

    Пэн, Х.и другие. BrainAligner: 3D-атласы регистрации мозга Drosophila . Nat. Методы 8 , 493–500 (2011).

    CAS Статья Google ученый

  • 17

    Сведлоу, Дж. Р. и Элисейри, К. В. Информатика биоизображений с открытым исходным кодом для клеточной биологии. Trends Cell Biol. 19 , 656–660 (2009).

    CAS Статья Google ученый

  • 18

    Пэн, Х.Информатика биоизображений: новое направление инженерной биологии. Биоинформатика 24 , 1827–1836 (2008).

    CAS Статья Google ученый

  • 19

    Abramoff, M. D., Magalhaes, P.J. & Ram, S.J. Обработка изображений с помощью ImageJ. Biophotonics International 11 , 36–42 (2004).

    Google ученый

  • 20

    Карпентер, А.E. et al. CellProfiler: программное обеспечение для анализа изображений для определения и количественной оценки фенотипов клеток. Genome Biol. 7 , R100 (2006).

    Артикул Google ученый

  • 21

    Peng, H., Ruan, Z., Long, F., Simpson, J.H. & Myers, E.W. V3D обеспечивает трехмерную визуализацию в реальном времени и количественный анализ крупномасштабных наборов данных биологических изображений. Nat. Biotechnol. 28 , 348–353 (2010).

    CAS Статья Google ученый

  • 22

    де Шомон, Ф., Dallongeville, S. & Olivo-Marin, J.-C. ICY: новое программное обеспечение для обработки изображений с открытым исходным кодом в формате. IEEE Int. Symp. по биомедицинской визуализации 234–237 (2011).

  • 23

    Berthold, M.R. et al. KNIME: Konstanz Information Miner. в исследованиях по классификации, анализу данных и организации знаний (GfKL 2007) 319–326 (Springer, 2007).

  • 24

    Cardona, A. et al. Программа TrakEM2 для реконструкции нейронных цепей. PLoS One (в печати).

  • 25

    Шмид, Б., Шинделин, Дж., Кардона, А., Лонгаир, М. и Гейзенберг, М. API-интерфейс трехмерной визуализации высокого уровня для Java и ImageJ. BMC Bioinformatics 11 , 274 (2010).

    Артикул Google ученый

  • 26

    Preibisch, S., Saalfeld, S., Schindelin, J. & Tomancak, P. Программное обеспечение для регистрации данных микроскопии селективного плоского освещения на основе шариков. Nat. Методы 7 , 418–419 (2010).

    CAS Статья Google ученый

  • 27

    Preibisch, S., Tomancak, P. & Saalfeld, S. в Proc. ImageJ User and Developer Conf. 1 , 72–76 (2010).

    Google ученый

  • 28

    Matas, J., Chum, O., Urban, M. & Pajdla, T. Устойчивое стереозвучание с широкой базой из максимально стабильных экстремальных областей. Изображение Vis. Comput. 22 , 761–767 (2004).

    Артикул Google ученый

  • 29

    Ибанез, Л., Шредер, В., Нг, Л. и Кейтс, Дж. Руководство по программному обеспечению ITK (Kitware Inc., 2005).

  • 30

    Кёте, У. Многоразовое программное обеспечение для компьютерного зрения. в Справочнике по компьютерному зрению и приложениям Vol. 3 (ред. Яне Б., Хаусеккер Х. и Гейсслер П.) 103–132 (Сан-Диего: Academic Press, 1999).

  • 31

    Прейбиш, С., Saalfeld, S. & Tomancak, P. Оптимальное в глобальном масштабе сшивание мозаичных трехмерных микроскопических изображений. Биоинформатика 25 , 1463–1465 (2009).

    CAS Статья Google ученый

  • 32

    Cardona, A. et al. Интегрированный микро- и макроархитектурный анализ мозга Drosophila с помощью компьютерной серийной электронной микроскопии. PLoS Biol. 8 , e1000502 (2010).

    Артикул Google ученый

  • 33

    Bock, D.D. и другие. Сетевая анатомия и in vivo физиология нейронов зрительной коры. Nature 471 , 177–182 (2011).

    CAS Статья Google ученый

  • 34

    Кайниг, В., Фишер, Б., Мюллер, Э. и Бухманн, Дж. М. Полностью автоматическое сшивание и коррекция искажений изображений просвечивающего электронного микроскопа. J. Struct. Биол. 171 , 163–173 (2010).

    Артикул Google ученый

  • 35

    Saalfeld, S., Fetter, R., Cardona, A. & Tomancak, P. Реконструкция упругого объема на основе серий ультратонких срезов для микроскопии. Nature Methods предварительная онлайн-публикация, DOI: 10.1038 / nmeth.2072 (10 июня 2012 г.).

  • 36

    Arganda-Carreras, I. et al. Последовательная и эластичная регистрация гистологических срезов с использованием вектор-сплайновой регуляризации.in Lecture Notes in Computer Science 4241 , 85–95 (Springer, 2006).

    Артикул Google ученый

  • 37

    Lowe, D. G. Отличительные особенности изображения от масштабно-инвариантных ключевых точек. Внутр. J. Comput. Vis. 60 , 91–110 (2004).

    Артикул Google ученый

  • 38

    Сетиан, Дж. А. Методы набора уровней и методы быстрого перехода: развивающиеся интерфейсы в вычислительной геометрии, механике жидкости, компьютерном зрении и материаловедении (Cambridge University Press, 1999).

  • 39

    Касс, М., Уиткин, А. и Терзопулос, Д. Змеи: модели активного контура. Внутр. J. Comput. Vis. 1 , 321–331 (1988).

    Артикул Google ученый

  • 40

    Hall, M. et al. Программное обеспечение интеллектуального анализа данных WEKA: обновление. SIGKDD Explor. 11 , 10–18 (2009).

    Артикул Google ученый

  • 41

    Кайниг, В., Fuchs, T.J. И Бухманн, Дж. М. Геометрическая согласованная трехмерная трассировка нейронных процессов в данных ssTEM. Med. Изображение. Comput. Comput. Ассистент. Интерв. 13 , 209–216 (2010).

    PubMed Google ученый

  • 42

    Cardona, A. et al. Идентификация клонов нейронов Drosophila путем анализа последовательности трактов аксонов. J. Neurosci. 30 , 7538–7553 (2010).

    CAS Статья Google ученый

  • 43

    Лонгэр, М. Х., Бейкер Д.А. И Армстронг, J.D. Simple Neurite Tracer: программное обеспечение с открытым исходным кодом для реконструкции, визуализации и анализа нейронных процессов. Биоинформатика 27 , 2453–2454 (2011).

    CAS Статья Google ученый

  • 44

    Эдельштейн, А., Амодай, Н., Гувер, К., Вейл, Р. и Стурман, Н. Компьютерное управление микроскопами с помощью μManager. в Current Protocols in Molecular Biology (John Wiley & Sons, Inc., 2010).

  • Выбор подходящей платформы социальных сетей для вашего бизнеса

    Когда вы заняты своим бизнесом, невозможно найти время, чтобы быть активным в каждой социальной сети. Ограничение вашего выбора до нескольких избранных платформ позволит вам сосредоточить свои усилия и получить максимальную отдачу от вложенного времени.

    Так как же выбрать лучшую платформу для социальных сетей? Вот три шага, чтобы определить, какая платформа идеально подходит для вашего бизнеса.

    Шаг 1. Определите свою аудиторию

    Первый шаг - определить, кто ваша аудитория. Вы должны быть как можно более конкретными, так как это облегчит ваше решение. Запишите ответы на следующие вопросы:

    • Кто ваш типичный покупатель?
    • Сколько им лет?
    • Они мужчины или женщины?
    • Каков их доход и уровень образования?
    • Что их интересует помимо ваших продуктов и услуг?

    Используйте ответы на эти вопросы (и любые другие уместные вопросы, которые могут относиться к бизнесу или отрасли, в которой вы работаете), чтобы помочь создать профиль вашей аудитории.

    Шаг 2. Определите свои цели

    Как только вы узнаете свою аудиторию, вам нужно определить цели для этой аудитории. Как владелец бизнеса, ваша основная цель, вероятно, будет заключаться в стимулировании продаж за счет привлечения клиентов, но у социальных сетей есть и другие творческие цели. В то время как некоторые бренды используют социальные сети для повышения узнаваемости бренда и развития дружеских отношений с потенциальными покупателями, другие используют социальные сети для поддержки клиентов.

    Например, медийная компания по запросу Netflix использует обработчик Twitter @Netflixhelps для решения проблем с обслуживанием клиентов.Это не только освобождает их телефонные линии, но и дает довольным клиентам возможность продвигать свой бренд.

    Когда дело доходит до постановки целей в социальных сетях, составьте список как типичных, так и необычных способов, которыми социальные сети могут работать на ваш бренд.

    Шаг 3. Найдите свою аудиторию

    Теперь, когда у вас есть профиль вашей аудитории и определены ваши цели, пора найти свою аудиторию. Для этого вы собираетесь определить, какую платформу использует ваша аудитория, глядя на демографические данные пользователей на каждой платформе.Вы также захотите оценить, насколько активна ваша аудитория на этой платформе. Например, хотя у молодых пользователей Facebook могут быть профили, они более активны в Instagram.

    Помимо демографических данных и вовлеченности, вы также захотите посмотреть, как люди используют платформу.

    Ниже приводится руководство по некоторым основным платформам социальных сетей, которое поможет вам найти свою аудиторию.

    Facebook

    Facebook сообщает более 1.3 миллиарда пользователей - это больше, чем население Китая! Несмотря на весь этот шум, важно помнить, как люди используют Facebook: чтобы строить отношения и поддерживать контакты со старыми друзьями. Это делает Facebook хорошей платформой для повышения лояльности вашей существующей клиентской базы.

    Обратной стороной Facebook является то, что может быть трудно привлечь новую аудиторию; из-за большого количества пользователей ваши сообщения имеют ограниченный охват даже в ваших собственных сетях.

    Оценивая Facebook как потенциальную платформу, внимательно обдумывайте свои бизнес-цели. Если вы пытаетесь приобрести новый бизнес, Facebook может быть не лучшим вариантом, но если вы собираете постоянных подписчиков и вам нужен способ поддерживать с ними связь, это отличный вариант для вашего бизнеса.

    Твиттер

    Twitter - отличная платформа для повышения узнаваемости вашего бренда. Твиттер использует хэштег, который организует разговоры вокруг слова или фразы. Выполняя поиск по хэштегам, вы можете узнать, о чем говорят люди, чтобы вы могли создавать свои твиты, чтобы участвовать в популярных обсуждениях.Зачем тебе это делать? Поскольку Twitter может дать представление о том, какие темы актуальны, Twitter часто используется новостными агентствами для поиска статей.

    Поскольку Twitter часто используется для предоставления аудитории обновлений в реальном времени, многие бренды сочетают Twitter с офлайн-взаимодействием, например с мероприятиями.

    Pinterest

    Pinterest используется для «скрапбукинга» или, другими словами, для сохранения контента путем «закрепления» фотографий на виртуальной доске объявлений. Пользователи-женщины доминируют в демографической группе Pinterest. Некоторые из наиболее распространенных булавок - это рецепты, идеи стиля, яркие фотографии и поделки своими руками.

    Поскольку Pinterest - это платформа, основанная на визуализации, вам понадобится качественная графика для привлечения пользователей. Успешное использование Pinterest в бизнесе связано с высокими розничными продажами.

    YouTube

    Хотя YouTube насчитывает 1 миллиард пользователей, его охват намного превышает этот показатель. Вам не нужно регистрироваться, чтобы стать пользователем для просмотра контента на YouTube.

    В результате YouTube стал одной из крупнейших платформ поисковых систем. Многие из этих запросов относятся к видео с инструкциями. Компании сферы услуг, которые могут предлагать этот тип контента, хорошо работают на этой платформе.

    LinkedIn

    LinkedIn отличается тем, что является наиболее используемой платформой для пожилых людей. Он может похвастаться наибольшим количеством пользователей в возрасте от 30 до 49 лет. LinkedIn уникален еще и тем, что имеет узкую направленность.Люди используют LinkedIn для поиска работы и профессионального общения. В результате платформа полезна для генерации лидов B2B, общего сетевого взаимодействия, а также для набора сотрудников.

    Instagram

    Instagram - одна из самых быстрорастущих платформ, особенно среди молодой аудитории. Как и Pinterest, Instagram использует фотографии для общения. В результате эта платформа действительно хорошо работает для визуальных предприятий, таких как искусство, еда, розничная торговля и красота.

    Поскольку это развивающаяся платформа, здесь меньше шума, чем у Facebook. Это означает, что платформа полезна для привлечения потенциальных клиентов, потому что ваш охват шире.

    Google+

    Google+ известен пожилыми мужчинами. Эта платформа хорошо подходит для компаний, занимающихся программным обеспечением, проектированием и дизайном.

    Поскольку платформа связана с поиском Google, она имеет больший вес в привлечении трафика на ваш сайт.Таким образом, вам следует подумать об использовании Google+, если вашей целью является поисковая оптимизация.

    Платформа Knox для предприятий | Расширенное управление мобильной безопасностью

    Доверенная среда с аппаратной поддержкой Аппаратный корень доверия Полностью поддерживается Полностью поддерживается Частично поддерживается Уникальные аппаратные ключи устройства и одноразовые программируемые предохранители
    Повышение доверия Полностью поддерживается Полностью поддерживается Частично поддерживается с аппаратной поддержкой
    Поддерживать доверие Полностью поддерживается Полностью поддерживается Частично поддерживается Защита ядра во время выполнения
    Подтвердите доверие Полностью поддерживается Полностью поддерживается Частично поддерживается Аппаратное обеспечение, идентификация устройства
    Надежная защита данных Данные в состоянии покоя Аппаратная изоляция данных Полностью поддерживается Частично поддерживается Частично поддерживается Поддержка сторонних контейнеров, гранулярная конфигурация
    Шифрование на устройстве Полностью поддерживается Полностью поддерживается Полностью поддерживается
    Защита конфиденциальных данных Полностью поддерживается Полностью поддерживается Не поддерживается Защита данных в состоянии покоя, даже когда устройство используется
    Данные в пути Гибкие параметры VPN на устройстве Полностью поддерживается Частично поддерживается Частично поддерживается По запросу, двойное соединение, веб-защита через VPN, локальный обход
    Gov. -сертифицированный встроенный VPN-клиент Полностью поддерживается Полностью поддерживается Частично поддерживается Функции, сертифицированные государством
    Управление межсетевым экраном на устройстве Полностью поддерживается Полностью поддерживается Не поддерживается Фильтрация на основе URL-адресов, управление для каждого приложения, журналы заблокированного доступа
    Комплексное управление устройствами Широкий выбор конфигураций устройств Полностью поддерживается Частично поддерживается (с добавлением дифференциации) Частично поддерживается Расширенные параметры аутентификации, настройка заставки при загрузке и т. Д.
    Расширенное управление мобильными приложениями Полностью поддерживается Полностью поддерживается Частично поддерживается (с добавлением дифференциации) Детальное управление приложениями без управляемого Google Play
    Ограничение функций устройства на уровне системы Полностью поддерживается Частично поддерживается (с добавлением дифференциации) Частично поддерживается Заводские настройки (режим восстановления), прошивка прошивки (режим загрузки)
    Контроль и управление гранулированными устройствами Углубленное использование устройства Полностью поддерживается Не поддерживается Не поддерживается Журналы аудита
    Углубленное использование сети Полностью поддерживается Не поддерживается Не поддерживается Аналитика сетевой платформы
    Оптимизированный пульт дистанционного управления Полностью поддерживается Полностью поддерживается Частично поддерживается Высокопроизводительное управление на уровне всего устройства; SECURE_FLAG заменяет
    Универсальное управление учетными данными / сертификатами Универсальное управление учетными данными Полностью поддерживается Не поддерживается Не поддерживается Настраиваемая блокировка клавиатуры / ODE
    Управление сертификатами клиентов на основе аппаратного обеспечения Полностью поддерживается Полностью поддерживается Частично поддерживается Аппаратное обеспечение, широкий спектр поддержки CSR / CEP
    Сертифицировано и пользуется доверием экспертов и государственных органов Полностью поддерживается Частично поддерживается Частично поддерживается (с добавлением дифференциации) Самые "сильные" оценки Gartner
    Аппаратный корень доверия

    KPE Premium: полностью поддерживается

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Уникальные аппаратные ключи устройства и одноразовые программируемые предохранители

    Укрепление доверия

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Аппаратное обеспечение

    Поддерживать доверие

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Защита ядра во время выполнения

    Подтвердите доверие

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Аппаратное обеспечение, идентификация устройства

    Данные в состоянии покоя
    Аппаратная изоляция данных

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: частично поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Поддержка сторонних контейнеров, гранулярная конфигурация

    Данные в состоянии покоя
    Шифрование на устройстве

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: полностью поддерживается

    Данные в состоянии покоя
    Защита конфиденциальных данных

    KPE Premium: полностью поддерживается

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: не поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Защита данных в состоянии покоя, даже когда устройство используется

    Данные в пути
    Гибкие параметры VPN на устройстве

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: частично поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    По запросу, двойное соединение, веб-защита через VPN, локальный обход

    Данные в пути
    Gov.
    -сертифицированный встроенный VPN-клиент

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Функции, сертифицированные государством

    Данные в пути
    Управление межсетевым экраном на устройстве

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: не поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Фильтрация на основе URL, управление каждым приложением, журналы заблокированного доступа

    Широкий выбор конфигураций устройств

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: частично поддерживается (с добавлением дифференциации)

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Расширенные параметры аутентификации, настройка заставки при загрузке и т. Д.

    Расширенное управление мобильными приложениями

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Детальное управление приложениями без управляемого Google Play

    Ограничение функций устройства на уровне системы

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: частично поддерживается (с добавлением дифференциации)

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Заводские настройки (режим восстановления), прошивка прошивки (режим загрузки)

    Углубленное использование устройства

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: не поддерживается

    Android Enterprise *: не поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Журналы аудита

    Углубленное использование сети

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: не поддерживается

    Android Enterprise *: не поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Аналитика сетевой платформы

    Оптимизированный пульт дистанционного управления

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Высокопроизводительное управление на уровне устройства; SECURE_FLAG заменяет

    Универсальное управление учетными данными

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: не поддерживается

    Android Enterprise *: не поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Настраиваемая блокировка клавиатуры / ODE

    Управление сертификатами клиентов на основе аппаратного обеспечения

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: полностью поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Аппаратная поддержка, широкий спектр поддержки CSR / CEP

    KPE Premium: Полная поддержка

    Стандарт КПЭ: частично поддерживается

    Android Enterprise *: частично поддерживается

    Спецификация КПЭ:

    Самые "сильные" оценки Gartner

    .

    Leave a Reply